Pojęcie chorób mitochondrialnych. Zespół encefalomiopatii zubożenia mitochondrialnego DNA. Zespół zubożenia DNA

Istnieje wiele chorób przewlekłych, których jednym z patogenetycznych ogniw jest wtórny niedobór mitochondriów. Ich lista jest daleka od kompletnej i wciąż się powiększa.

Wszystkie te zaburzenia mają charakter polimorficzny, mogą mieć różny stopień nasilenia i mogą być przedmiotem zainteresowania lekarzy specjalistów różnych dziedzin – neuropatologów, kardiologów, neonatologów, nefrologów, chirurgów, urologów, otorynolaryngologów, pulmonologów itp.

Według naszych danych co najmniej jedna trzecia wszystkich dzieci niepełnosprawnych w zespole objawów swoich chorób ma objawy wieloukładowego zaburzenia energii komórkowej. Należy zauważyć, że w ostatnich latach znacznie wzrosła liczba dzieci z chorobami, którym towarzyszy wysokie prawdopodobieństwo niedotlenienia tkanek.

Badania przeprowadzone niedawno w Moskiewskim Instytucie Badawczym Pediatrii i Chirurgii Dziecięcej u dzieci przyjętych do kliniki genetycznej z niezróżnicowanymi zaburzeniami rozwoju fizycznego i neuropsychicznego wykazały, że połowa z nich miała zaburzenia w komórkowej wymianie energii. Po raz pierwszy pracownicy tego instytutu stwierdzili występowanie zaburzeń mitochondrialnych w takich patologiach u dzieci: choroby tkanki łącznej (zespół Marfana i Ehlersa-Danlosa), stwardnienie guzowate, szereg zespołów nieendokrynnych z towarzyszącym opóźnieniem wzrostu (osteochondrodysplazja, zespół Aarskoga, zespół Silvera-Russella itp.), ujawniono wpływ niedoboru mitochondriów na przebieg wielu schorzeń kardiologicznych, dziedzicznych, chirurgicznych i innych. Wspólnie z pracownikami Smoleńskiej Akademii Medycznej opisano wyrównującą się niewydolność mitochondrialną w cukrzycy typu 1 u dzieci z okresem choroby powyżej 5 lat.

Na szczególną uwagę zasługują wieloukładowe dysfunkcje mitochondriów spowodowane czynnikami ekopatogennymi. Wśród tych ostatnich są zarówno dobrze znane (na przykład tlenek węgla, cyjanki, sole metali ciężkich), jak i stosunkowo niedawno opisane (przede wszystkim skutki uboczne wielu leków - azydotymidyny, walproinianów, aminoglikozydów i kilku innych). Ponadto do tej samej grupy należą dysfunkcje mitochondrialne spowodowane szeregiem zaburzeń żywieniowych (przede wszystkim niedoborem witamin z grupy B).

Na koniec należy osobno wspomnieć, że według wielu badaczy wzrost liczby dysfunkcji mitochondrialnych jest, jeśli nie głównym, to jednym z najważniejszych mechanizmów starzenia. Na Międzynarodowym Sympozjum Patologii Mitochondriów, które odbyło się w Wenecji w 2001 roku, zgłoszono odkrycie specyficznych mutacji mitochondrialnego DNA, które pojawiają się wraz z wiekiem. Mutacje te nie występują u młodych pacjentów, a u osób starszych są określane w różnych komórkach organizmu z częstością ponad 50%.

Patogeneza.

Zmniejszenie dostarczania tlenu do komórki nerwowej w warunkach ostrego niedokrwienia prowadzi do szeregu regulacyjnych zmian czynnościowych i metabolicznych w mitochondriach, wśród których wiodącą rolę odgrywają zaburzenia stanu mitochondrialnych kompleksów enzymatycznych (MFC) prowadzących do zahamowania tlenowej syntezy energii. Ogólna reakcja organizmu na ostry niedobór tlenu charakteryzuje się aktywacją pilnych regulacyjnych mechanizmów kompensacyjnych. W komórce neuronalnej aktywowane są kaskadowe mechanizmy transdukcji sygnałów wewnątrzkomórkowych, które są odpowiedzialne za ekspresję genów i tworzenie cech adaptacyjnych. Taka aktywacja pojawia się już po 2-5 minutach głodu tlenu i przebiega na tle spadku oddychania związanego z supresją MFC-1. Potwierdzeniem udziału wewnątrzkomórkowych systemów sygnalizacyjnych w procesach adaptacyjnych, które są niezbędne do powstawania zależnych od genomu reakcji adaptacyjnych, jest aktywacja kinaz białkowych – końcowych ogniw tych systemów, otwarcie kanału mito-KATP, wzmocnienie związanego z tym transportu K+ zależnego od ATP oraz zwiększonej produkcji H2O2.

Na tym etapie reakcji adaptacyjnych kluczową rolę przypisuje się rodzinom tzw. genów wczesnych, których produkty regulują ekspresję genów późnodziałających. Dotychczas ustalono, że w mózgu geny te obejmują NGFI-A, c-jun, junB, c-fos, które odgrywają ważną rolę w procesach plastyczności neuronów, uczenia się, przetrwania/śmierci neuronów. Gdy prekondycjonowanie miało działanie ochronne i korygowało zaburzenia spowodowane ciężkim niedotlenieniem w strukturach mózgu wrażliwych na hipoksję, zaobserwowano wzrost ekspresji mRNA wszystkich tych genów, a także mRNA mitochondrialnych genów antyoksydacyjnych.

Dłuższemu przebywaniu w warunkach obniżonej zawartości tlenu towarzyszy przejście na nowy poziom regulacji homeostazy tlenowej, który charakteryzuje się ekonomizacją metabolizmu energetycznego (zmiana właściwości kinetycznych enzymów metabolizmu oksydacyjnego, której towarzyszy wzrost w efektywności fosforylacji oksydacyjnej, pojawienie się nowej populacji małych mitochondriów z zestawem enzymów, które pozwalają im pracować w tym nowym trybie). Ponadto w tych warunkach adaptacja do hipoksji na poziomie komórkowym jest ściśle związana z ekspresją transkrypcyjną genów o późnym działaniu indukowanym hipoksją, które są zaangażowane w regulację wielu funkcji komórkowych i systemowych i są niezbędne do tworzenia cech adaptacyjnych . Wiadomo, że przy niskich stężeniach tlenu proces ten jest kontrolowany przede wszystkim przez specyficzny czynnik transkrypcyjny indukowany niedotlenieniem we wszystkich tkankach (HIF-1). Odkryty na początku lat 90. czynnik pełni funkcję głównego regulatora homeostazy tlenu i jest mechanizmem, za pomocą którego organizm w odpowiedzi na niedotlenienie tkanek kontroluje ekspresję białek odpowiedzialnych za mechanizm dostarczania tlenu do komórki, tj. reguluje adaptacyjne reakcje komórek na zmiany w natlenieniu tkanek.

Obecnie zidentyfikowano dla niego ponad 60 bezpośrednich genów docelowych. Wszystkie przyczyniają się do poprawy dostarczania tlenu (erytropoeza, angiogeneza), adaptacji metabolicznej (transport glukozy, zwiększona produkcja glikolitycznego ATP, transport jonów) oraz proliferacji komórek. Produkty regulowane przez HIF-1 działają na różnych poziomach funkcjonalnych. Efektem końcowym tej aktywacji jest wzrost wnikania O2 do komórki.

Identyfikacja i klonowanie HIF-1 umożliwiło ustalenie, że jest to heterodimeryczne białko wrażliwe na reakcję redoks składające się z dwóch podjednostek: podjednostki HIF-1b wrażliwej na ekspresję tlenową i podjednostki HIF-1c o konstytutywnej ekspresji (jądrowy receptor węglowodorów arylowych). translokator) — ARNT). Heterodimeryzując z receptorem arylokarboksylowym (AHR), tworzy funkcjonalny receptor dioksynowy. Znane są również inne białka z rodziny HIF-1b: HIF-2b, HIF-3b. Wszystkie należą do rodziny białek zasadowych, zawierających w aminokwasowej części końcowej każdej podjednostki podstawową domenę helisy-pętli-helisy (bHLH), która jest charakterystyczna dla wielu różnych czynników transkrypcyjnych i jest niezbędna do dimeryzacji i wiązania. DNA.

HIF-1b składa się z 826 reszt aminokwasowych (120 kD) i zawiera dwie domeny transkrypcyjne na C-końcu. W warunkach normoksycznych jego synteza zachodzi z małą szybkością, a jej zawartość jest minimalna, ponieważ ulega szybkiej ubikwitynacji i degradacji przez proteasomy. Proces ten zależy od interakcji pierwotnej struktury HIF-1b i jego specyficznej domeny degradacji zależnej od tlenu (ODDD) z białkiem von Hippel Lindau (VHL), które jest szeroko rozpowszechnione w tkankach, supresorem wzrostu guza, który działa jak białko ligaza.

Podstawą molekularną takiej regulacji jest zależna od O2 hydroksylacja dwóch reszt prolinowych P402 i P564, które są częścią struktury HIF-1b, przez jeden z trzech enzymów znanych pod wspólną nazwą „białka domeny hydroksylazy prolilowej (PHD)”. ” lub „HIF-1b-prolylyl hydroxylaza ”, który jest niezbędny do wiązania HIF-1b z białkiem VHL. Obowiązkowymi składnikami procesu są również β-ketoglutaran, witamina C i żelazo. Wraz z tym zachodzi hydroksylacja reszty asparaginy w C-końcowej domenie transaktywacyjnej (C-TAD), co prowadzi do tłumienia aktywności transkrypcyjnej HIF-1b. Po hydroksylacji reszt proliny w ODDD i reszty asparaginy, HIF-1b wiąże się z białkiem VHL, dzięki czemu dostępna jest ta podjednostka degradacji proteasomów.

W warunkach ostrego niedoboru tlenu następuje zahamowanie zależnego od tlenu procesu hydroksylacji reszt prolilu, charakterystycznego dla normoksji. Z tego powodu VHL nie może wiązać się z HIF-1b, jego degradacja przez proteasomy jest ograniczona, co umożliwia jego akumulację. W przeciwieństwie do tego, p300 i CBP mogą wiązać się z HIF-1b, ponieważ proces ten nie zależy od hydroksylacji asparaginylu. Zapewnia to aktywację HIF-1b, jego translokację do jądra, dimeryzację z HIF-1b, prowadzącą do zmian konformacyjnych, tworzenia aktywnego kompleksu transkrypcyjnego (HRE), który wyzwala aktywację szerokiego zakresu HIF-1- zależne geny docelowe i synteza ochronnych białek adaptacyjnych w odpowiedzi na niedotlenienie.

Powyższe mechanizmy transdukcji sygnału wewnątrzkomórkowego zachodzą w komórce podczas jej adaptacji do hipoksji. W przypadku dezadaptacji w komórce kumuluje się znaczne stężenie ROS i uruchamiane są procesy jej apoptotycznej śmierci.

Do tych pierwszych należą w szczególności transfer fosfatydyloseryny do warstwy błony zewnętrznej oraz fragmentacja DNA pod wpływem ROS i NO. W tej błonie fosfatydyloseryna jest zwykle obecna tylko w wewnętrznej warstwie lipidowej. Taka asymetryczna dystrybucja tego fosfolipidu jest spowodowana działaniem specjalnej ATPazy transportowej, która przenosi fosfatydyloserynę z zewnętrznej warstwy lipidowej błony komórkowej do wewnętrznej. Ta ATPaza jest albo inaktywowana przez utlenioną postać fosfatydyloseryny, albo po prostu „nie rozpoznaje” utlenionego fosfolipidu. Dlatego utlenianie fosfatydyloseryny przez ROS prowadzi do jej pojawienia się w zewnętrznej warstwie błony komórkowej. Podobno w zewnętrznej warstwie lipidowej istnieje specjalny receptor, który wykrywa fosfatydyloserynę. Przypuszcza się, że receptor ten, wiążąc się z fosfatydyloseryną, wysyła do komórki sygnał apoptozy.

Fosfatydyloseryna odgrywa kluczową rolę w tzw. wymuszonej apoptozie wywołanej przez pewien typ leukocytów. Komórka z fosfatydyloseryną w zewnętrznej warstwie błony komórkowej jest „rozpoznawana” przez te leukocyty, które inicjują jej apoptozę. Jednym z mechanizmów apoptogennych wykorzystywanych przez leukocyty jest to, że leukocyty zaczynają wydzielać białka perforynę i granzymy do przestrzeni międzykomórkowej w pobliżu komórki docelowej. Perforyna robi dziury w zewnętrznej błonie komórki docelowej. Granzymy dostają się do komórki i wywołują w niej apoptozę.

Innym sposobem stosowanym przez leukocyty w celu zmuszenia komórki docelowej do wejścia w apoptozę jest bombardowanie jej nadtlenkiem wytwarzanym poza leukocytem przez specjalny transbłonowy łańcuch oddechowy błony komórkowej. Łańcuch ten utlenia wewnątrzkomórkowy NADPH, z którego elektrony są przenoszone do flawiny, a następnie do specjalnego cytochromu b, który może zostać utleniony tlenem w celu uwolnienia ponadtlenku poza leukocyt. Nadtlenek i inne utworzone z niego ROS utleniają fosfatydyloserynę błony komórkowej komórki docelowej, wzmacniając w ten sposób sygnał apoptotyczny wysyłany do komórki przez ten fosfolipid.

Ponadto leukocyty zawierają czynnik martwicy nowotworu. TNF wiąże się ze swoim receptorem po zewnętrznej stronie błony plazmatycznej komórki docelowej, co aktywuje kilka równoległych ścieżek wyzwalania apoptozy. W jednym z nich dochodzi do powstawania aktywnej kaspazy-8 z pro-kaspazy-8. Kaspaza-8 jest proteazą, która rozszczepia cytozolowe białko Bid z utworzeniem jego aktywnej formy tBid (skrócona Bid). tBid zmienia konformację innego białka Bax, powodując powstanie w błonie zewnętrznej mitochondriów kanału przepuszczalnego dla białek, co prowadzi do ich wyjścia z przestrzeni międzybłonowej do cytozolu.

Różnorodność szlaków apoptozy zależnej od ROS przedstawiono na ryc. 1. Prawdziwy obraz jest najprawdopodobniej jeszcze bardziej złożony, ponieważ oprócz TNF istnieją inne zewnątrzkomórkowe induktory apoptozy (cytokiny), z których każdy działa poprzez swój własny receptor. Ponadto istnieją systemy antyapoptotyczne, które sprzeciwiają się systemom proapoptotycznym. Wśród nich są białka typu Bcl-2, które hamują proapoptotyczną aktywność Bax; wspomniane już inhibitory kaspazy (IAP); białko NFkB (czynnik jądrowy kB) indukowane przez TNF. NFkB obejmuje grupę genów, wśród których znajdują się te kodujące dysmutazę ponadtlenkową oraz inne białka antyoksydacyjne i antyapoptotyczne.

Wszystkie te trudności odzwierciedlają oczywistą okoliczność, że dla komórki „decyzja o popełnieniu samobójstwa” jest środkiem skrajnym, gdy wszystkie inne możliwości zapobiegania jej błędnym działaniom zostały wyczerpane.

Biorąc pod uwagę powyższe, możemy sobie wyobrazić następujący scenariusz wydarzeń mających na celu ochronę organizmu przed ROS generowanymi przez mitochondria. Powstające w mitochondriach ROS powodują otwarcie porów, a w konsekwencji uwolnienie cytochromu C do cytozolu, co natychmiast uruchamia dodatkowe mechanizmy antyoksydacyjne, a następnie mitoptozę. Jeśli tylko niewielka część wewnątrzkomórkowej populacji mitochondriów przechodzi w mitoptozę, stężenia cytochromu C i innych mitochondrialnych białek proapoptotycznych w cytozolu nie osiągają wartości niezbędnych do aktywacji apoptozy. Jeśli coraz więcej mitochondriów staje się superproducentami ROS i „otwartymi kamieniami królewskimi”, te stężenia wzrastają i zaczyna się apoptoza komórki zawierającej wiele wadliwych mitochondriów. W rezultacie tkanka zostaje oczyszczona z komórek, których mitochondria wytwarzają zbyt dużo ROS.

Możemy zatem mówić o dysfunkcji mitochondriów jako o nowym patobiochemicznym mechanizmie wielu schorzeń neurodegeneracyjnych. Obecnie rozróżnia się dwa rodzaje dysfunkcji mitochondriów – pierwotne, będące wynikiem wrodzonej wady genetycznej, oraz wtórne, powstałe pod wpływem różnych czynników: niedotlenienia, niedokrwienia, stresu oksydacyjnego i nitrozowego oraz ekspresji cytokin prozapalnych. We współczesnej medycynie coraz ważniejsze miejsce zajmuje doktryna wieloukładowych zaburzeń metabolizmu energetycznego komórek, tzw. patologii mitochondrialnej, czyli dysfunkcji mitochondrialnej.

Dysfunkcje mitochondrialne to niejednorodna grupa patologii spowodowanych genetycznymi, biochemicznymi oraz strukturalnymi i funkcjonalnymi defektami mitochondriów z zaburzeniami oddychania komórkowego i tkankowego. Klasyfikacja dysfunkcji mitochondriów ma swoją historię. Jednym z pierwszych był schemat oparty na biochemicznych defektach metabolizmu. Systematyzacja według zespołów klinicznych również nie była wystarczająco głęboka, wśród nich wcześniej wyróżniono:

• 1) zespoły o ustalonej naturze mitochondrialnej;
• 2) zespoły przypuszczalnie mitochondrialne;
• 3) zespoły są konsekwencją patologii mitochondrialnej.

Pierwsza wzmianka o chorobie związanej z defektem w mitochondriach dotyczy 1962: R. Luft et al. opisał przypadek choroby, w której doszło do naruszenia sprzężenia oddychania i fosforylacji w mitochondriach mięśni szkieletowych u pacjenta z nadczynnością metabolizmu tarczycy. W kolejnych latach opisano kliniczne, biochemiczne i morfologiczne aspekty mitochondrialnych encefalomiopatii. Ważną rolę w rozwoju tego kierunku odegrało zastosowanie zmodyfikowanego barwienia Gomoriego, za pomocą którego możliwe było wykrycie włókien ze zmienionymi mitochondriami w mięśniach szkieletowych – tzw. poszarpane-czerwone włókna (RRF).

Później, wraz z odkryciem genomu mitochondrialnego i mutacji mDNA lub jądrowego DNA, możliwe było zastosowanie genetycznej zasady klasyfikacji pierwotnej, wrodzonej dysfunkcji mitochondriów – najpierw w formie uproszczonej, potem w bardziej skomplikowanej. Kluczowym obszarem patologii mitochondriów są zespoły dziedziczne, które opierają się na mutacjach w genach odpowiedzialnych za białka mitochondrialne (zespoły Kearnsa-Sayre'a, MELAS, MERRF, Pearson, Barth itp.). Dysfunkcje mitochondrialne objawiają się szeroką gamą objawów klinicznych. Mutacje te mogą obejmować tRNA, rRNA lub geny strukturalne i mogą ulegać ekspresji biochemicznej jako defekty w całym łańcuchu transportu elektronów lub jako defekty w poszczególnych enzymach.

W latach 90. identyfikacja wielu defektów mitochondrialnych, które powodują klinicznie bardzo różne zaburzenia, zbijała z tropu klinicystów w diagnozowaniu niejednorodnych i złożonych zespołów charakteryzujących się następującymi cechami:

• - mięśnie szkieletowe: niska tolerancja wysiłku, niedociśnienie, miopatia proksymalna, w tym mięśnie twarzy i gardła, oftalmopareza, opadanie powiek;
• - serce: zaburzenia rytmu serca, miokardiopatia przerostowa;
• - OUN: zanik nerwu wzrokowego, retinopatia barwnikowa, mioklonie, otępienie, epizody udaropodobne, zaburzenia psychiczne;
• - obwodowy układ nerwowy: neuropatia aksonalna, upośledzona aktywność ruchowa przewodu pokarmowego;
• -- układ hormonalny: cukrzyca, niedoczynność przytarczyc, upośledzona czynność zewnątrzwydzielnicza trzustki, niski wzrost.

Ponieważ pierwotna dysfunkcja mitochondriów objawia się u osoby z wieloma różnymi objawami, klinicyści próbowali połączyć niektóre grupy najczęstszych kombinacji objawów w zespoły:

• MELAS - Miopatia mitochondrialna, encefalopatia, kwasica mleczanowa i epizody udaropodobne (miopatia mitochondrialna, encefalopatia, kwasica mleczanowa, epizody udaropodobne).
• CPEO / PEO - Zespół oftalmoplegia zewnętrzna, Oftalmoplegia plus (oftalmoplegia związana z uszkodzeniem mięśni okoruchowych, zespół oftalmoplegia plus).
• KSS - Zespół Kearnsa - Sayre'a - retinopatia, osłabienie mięśni proksymalnych, zaburzenia rytmu serca i ataksja (retinopatia, osłabienie mięśni proksymalnych, arytmia, ataksja).
• · MERRF — padaczka miokloniczna związana z poszarpanymi czerwonymi włóknami.
• LHON - dziedziczna neuropatia nerwu wzrokowego Lebera (wrodzona neuropatia nerwu wzrokowego).
• · Zespół Leiga – dziecięca podostra martwicza encefalopatia (dziecięca podostra martwicza encefalopatia).
• · NAPR -- Neuropatia, ataksja i retinopatia pigmentowa (neuropatia, ataksja i retinopatia barwnikowa).

post zaktualizowany 28.02.2019

Wstęp(cechy ludzkich mitochondriów). Cechą funkcjonowania mitochondriów jest obecność własnego genomu mitochondrialnego – kołowego mitochondrialnego DNA (mtDNA) zawierającego 37 genów, których produkty biorą udział w procesie produkcji energii w łańcuchu oddechowym mitochondriów. mtDNA znajduje się w wewnętrznej błonie mitochondriów i składa się z pięciu sprzężonych kompleksów enzymatycznych, które łącznie składają się z 86 podjednostek. Kodowane są głównie przez geny jądrowe (nDNA), ale siedem podjednostek pierwszego kompleksu enzymatycznego (ND1, 2, 3, 4, 4L, 5, 6), jednej trzeciej (cytochrom b), trzech czwartej (COI , COII, COIII) i dwa z piątego (ATPaza 6 i 8) są kodowane przez geny strukturalne mtDNA. Tak więc kompleksy enzymatyczne (tj. białka) kodowane zarówno przez geny jądrowe (nDNA), jak i mitochondrialne (mtDNA) są zaangażowane w zapewnianie różnych funkcji biochemicznych mitochondriów.

Uwaga! Główne procesy biochemiczne związane z metabolizmem energetycznym zachodzące w mitochondriach to: cykl kwasów trikarboksylowych (cykl Krebsa), beta-oksydacja kwasów tłuszczowych, cykl karnityny, transport elektronów w łańcuchu oddechowym oraz fosforylacja oksydacyjna. Każdy z tych procesów może zostać zaburzony i spowodować niewydolność mitochondrialną.

Przyczyna choroby mitochondrialnej (dalej MB). Główne właściwości genomu mitochondrialnego to cytoplazmatyczne dziedziczenie genów, brak rekombinacji (czyli reorganizacja materiału genetycznego poprzez wymianę poszczególnych segmentów, regionów, podwójnych helis DNA) oraz wysoki wskaźnik mutacji. Genom mitochondrialny charakteryzuje się wyraźną niestabilnością i wysokim wskaźnikiem substytucji nukleotydów, średnio 10-17 razy wyższym niż wskaźnik mutacji genów jądrowych, a mutacje somatyczne często występują w nim w ciągu życia osobnika. Bezpośrednią przyczyną wystąpienia i rozwoju dysfunkcji mitochondriów są defekty układu fosforylacji oksydacyjnej, niedoskonałość mechanizmów naprawczych, brak histonów oraz obecność wolnych rodników tlenowych, które są produktami ubocznymi oddychania tlenowego.

Mutacje w genomie mitochondrialnym charakteryzują się zjawiskiem [ !!! ] heteroplazmia, w której (ze względu na specyfikę dziedziczenia mitochondrialnego), w wyniku podziału komórek, rozmieszczenie (bardzo zróżnicowane – od 1 do 99%) zmutowanego mtDNA pomiędzy komórkami potomnymi następuje losowo i nierównomiernie, w wyniku które kopie mtDNA niosą normalny i/lub zmutowany allel. Jednocześnie różne tkanki ciała lub sąsiadujące obszary tej samej tkanki mogą różnić się stopniem heteroplazmii, tj. w zależności od stopnia obecności i proporcji w komórkach ciała mitochondriów zarówno z zmutowanym, jak i prawidłowym mtDNA (w kolejnych pokoleniach niektóre komórki mogą mieć tylko normalne mtDNA, inna część tylko zmutowane, a trzecia część - oba typy mtDNA) . Stopniowo wzrasta zawartość mitochondriów ze zmutowanym mtDNA. Z powodu tego „okresu lagów” ​​(z angielskiego „lag” – opóźnienie) przyszli pacjenci często osiągają dojrzałość płciową (i wydają potomstwo, prawie zawsze niosące te same mutacje w mtDNA). Gdy liczba zmutowanych kopii mtDNA w komórce osiąga określony próg stężenia, metabolizm energetyczny w komórkach jest znacznie zaburzony i objawia się chorobą (uwaga: cechą dziedzicznego MB jest często całkowity brak jakichkolwiek patologicznych znaki na początku życia pacjenta).

Uwaga! Heteroplazmię charakteryzuje jednoczesne istnienie zmutowanego i prawidłowego mtDNA w tej samej komórce, tkance lub narządzie, co determinuje ciężkość, charakter i wiek manifestacji MB. Liczba zmienionego mtDNA może również wzrastać wraz z wiekiem pod wpływem różnych czynników i stopniowo osiągać poziom, który może powodować kliniczne objawy choroby.

Zgodnie z powyższymi cechami podwójnego genomu mitochondrialnego, rodzaj dziedziczenia MB może być różny. Ponieważ mtDNA w organizmie jest prawie wyłącznie pochodzenia matczynego, gdy mutacja mitochondrialna jest przekazywana potomstwu, w rodowodzie ma miejsce matczyny typ dziedziczenia - wszystkie dzieci chorej matki chorują. Jeśli mutacja występuje w genie jądrowym (nDNA) kodującym syntezę białka mitochondrialnego, choroba jest przenoszona zgodnie z klasycznymi prawami Mendla. Czasami mutacja mtDNA (zwykle delecja) pojawia się de novo we wczesnym stadium ontogenezy, a następnie choroba objawia się sporadycznie.

Uwaga! Obecnie wiadomo, że ponad 100 mutacji punktowych i kilkaset rearanżacji strukturalnych mtDNA jest związanych z charakterystycznymi zespołami nerwowo-mięśniowymi i innymi zespołami mitochondrialnymi, od śmiertelnych w okresie życia noworodków po choroby o późnym początku.

Definicja. MB można scharakteryzować jako choroby wywołane genetycznymi i strukturalno-biochemicznymi defektami mitochondriów, którym towarzyszy zaburzenie oddychania tkankowego i w efekcie ogólnoustrojowy defekt metabolizmu energetycznego, w wyniku którego najbardziej zależne energetycznie tkanki i docelowe narządy są zaatakowane w różnych kombinacjach: mózg, mięśnie szkieletowe i mięsień sercowy (mitochondrialne encefalomiopatie), trzustka, narząd wzroku, nerki, wątroba. Klinicznie naruszenia w tych narządach można zrealizować w każdym wieku. Jednocześnie niejednorodność objawów utrudnia diagnostykę kliniczną tych chorób. Konieczność wykluczenia MB pojawia się w obecności objawów wielosystemowych, które nie pasują do zwykłego procesu patologicznego. Częstość występowania dysfunkcji łańcucha oddechowego szacuje się od 1 na 5-10 tys. do 4-5 na 100 tys. noworodków.

Semiotyka. Patologia nerwowo-mięśniowa w MB jest zwykle reprezentowana przez otępienie, drgawki, ataksję, neuropatię wzrokową, retinopatię, głuchotę czuciowo-nerwową, neuropatię obwodową i miopatię. Jednak około 1/3 pacjentów z MB ma normalną inteligencję i nie wykazuje objawów nerwowo-mięśniowych. MB obejmuje w szczególności encefalokardiomiopatię Kearnsa-Sayre'a (barwnikowe zwyrodnienie siatkówki, oftalmoplegia zewnętrzna, całkowity blok serca); zespół MERRF (padaczka miokloniczna, „rozdarte” czerwone włókna); (encefalomiopatia mitochondrialna, kwasica mleczanowa, epizody udaropodobne); zespół Pearsona (encefalomiopatia, ataksja, otępienie, postępująca oftalmoplegia zewnętrzna); zespół NAPR (neuropatia, ataksja, barwnikowe zwyrodnienie siatkówki); i niektóre formy miopatii oftalmopatycznej. Wszystkie te formy łączy zespół miopatyczny wyrażony w takim czy innym stopniu.

Uwaga! Dwa główne objawy kliniczne MB to wzrost w czasie liczby narządów i tkanek zaangażowanych w proces patologiczny, a także prawie nieuniknione uszkodzenie ośrodkowego układu nerwowego. Polimorfizm objawów klinicznych, w tym uszkodzenia narządu, na pierwszy rzut oka niezwiązanych fizjologicznie i morfologicznie, w połączeniu z różnymi okresami manifestacji i stałą progresją objawów chorobowych wraz z wiekiem, pozwala podejrzewać mutację [genetyczną] mtDNA.

Uwaga! W praktyce klinicznej duże znaczenie ma możliwość odróżnienia obrazu klinicznego MB od bardziej powszechnych schorzeń somatycznych, autoimmunologicznych, endokrynologicznych i innych, z których większość można leczyć. Przed przypisaniem pacjentowi określonych badań genetycznych i biochemicznych, mających na celu poszukiwanie patologii mitochondrialnej, konieczne jest przeprowadzenie dokładnej oceny wywiadu rodzinnego, danych z rutynowych klinicznych i laboratoryjno-instrumentalnych metod badania.

Diagnostyka . Algorytm diagnozowania dowolnego MB powinien zawierać następujące kroki: [ 1 ] identyfikacja typowego obrazu klinicznego zespołu mitochondrialnego lub „niewytłumaczalnej” zmiany wielonarządowej oraz wywiad dziedziczny potwierdzający matczyny typ dziedziczenia; [ 2 ] dalsze poszukiwania diagnostyczne powinny mieć na celu wykrycie powszechnych markerów dysfunkcji mitochondriów: wzrostu poziomu mleczanu/pirogronianu w surowicy krwi i płynie mózgowo-rdzeniowym, zaburzenia metabolizmu węglowodanów, białek, aminokwasów, a także obrazu klinicznego obejmującego co najmniej trzy z tych układów w procesie patologicznym: OUN, układ sercowo-naczyniowy, mięśniowy, hormonalny, nerkowy, narządy wzroku i słuchu; [ 3 ] w przypadku klinicznych i potwierdzonych laboratoryjnych i instrumentalnych objawów patologii mitochondriów, przeprowadza się analizę PCR limfocytów krwi w celu ukierunkowanego poszukiwania mutacji punktowych mtDNA; badanie, które jest uważane za złoty standard w diagnostyce MB [cytopatii] - biopsja mięśni szkieletowych z histochemicznymi, mikroskopowymi elektronowymi, immunologicznymi i molekularnymi analizami genetycznymi, w których charakterystyczne zmiany będą występować w każdym MB (patrz poniżej); [ 5 ] najbardziej czułymi testami do diagnozowania MB są metody oceny poziomu patologicznej heteroplazmii mtDNA w różnych narządach i tkankach: fluorescencyjny PCR, klonowanie, denaturująca wysokosprawna chromatografia cieczowa, sekwencjonowanie, hybrydyzacja Southern blot itp.

Badanie histochemiczne próbek biopsyjnych mięśni pacjentów, w tym barwienie trichromowe metodą Gomory'ego, wykazuje zmiany charakterystyczne dla MB - rozerwanych czerwonych włókien miofibryli, które zawierają dużą liczbę proliferujących i uszkodzonych mitochondriów, tworzących aglomeraty wzdłuż obwodu włókna mięśniowego . W takim przypadku liczba rozdartych włókien czerwonych w biopsji powinna wynosić ≥ 2%. Analiza enzymatyczno-histochemiczna wykazała niedobór oksydazy cytochromu C w 2 i 5% miofibryli (u pacjentów w wieku poniżej 50 i powyżej 50 lat) ich całkowitej liczby w próbkach biopsyjnych. Analiza histochemiczna aktywności dehydrogenazy bursztynianowej (SDH) wykazała dodatnie barwienie miofibryli (postrzępionych niebieskich włókien) CDH, co w połączeniu z dodatnim barwieniem SDH ścian tętnic dostarczających krew do mięśni wskazuje na wysoki stopień uszkodzenia mitochondriów miocytów. Podczas wykonywania mikroskopii elektronowej próbek biopsji mięśni określa się wtrącenia patologiczne, strukturalne rearanżacje mitochondriów, zmiany ich kształtu, wielkości i liczby.

Uwaga! Pomimo znacznego postępu od odkrycia mutacji genetycznych mtDNA, większość metod diagnostycznych stosowanych w praktyce klinicznej ma niski stopień swoistości dla poszczególnych MB. Dlatego kryteria diagnostyczne dla konkretnego MB to przede wszystkim połączenie określonych wzorców klinicznych i morfologicznych.

Zasady leczenia . Terapia MB (cytopatii) ma charakter wyłącznie objawowy i ma na celu zmniejszenie tempa progresji choroby oraz poprawę jakości życia pacjentów. W tym celu pacjentom przepisuje się standardową kombinację leków, w tym koenzym Q10, idebenon – syntetyczny analog CoQ10, kreatynę, kwas foliowy, witaminy B2, B6, B12 oraz inne leki poprawiające reakcje redoks w komórkach (leki będące nośnikami elektronów w łańcuch oddechowy i kofaktory reakcji enzymatycznych metabolizmu energetycznego). Związki te stymulują syntezę cząsteczek ATP i zmniejszają aktywność procesów wolnorodnikowych w mitochondriach. Tymczasem, zgodnie z przeglądem systematycznym, większość leków o działaniu przeciwutleniającym i metabolicznym stosowanych w MB nie została oceniona w dużych randomizowanych badaniach kontrolowanych placebo. Dlatego trudno jest ocenić nasilenie ich działania terapeutycznego oraz obecność znaczących skutków ubocznych.

Przeczytaj więcej o MB w następujących źródłach:

artykuł „Patologia nerwowo-mięśniowa w chorobach mitochondrialnych” L.A. Saykova, V.G. Pustozery; Petersburska Akademia Medyczna Kształcenia Podyplomowego Roszdrav (czasopismo „Biuletyn Petersburskiej Akademii Medycznej Kształcenia Podyplomowego” 2009) [czytaj];

artykuł „Przewlekłe choroby o niezapalnej genezie i mutacje ludzkiego genomu mitochondrialnego” K.Yu. Mitrofanow, A.V. Zhelankin, mgr Sazonova, I.A. Sobenin, A.Yu. Postnow; Centrum Innowacji Skołkowo. Instytut Badawczy Miażdżycy, Moskwa; Instytut Badawczy GBOU Patologii Ogólnej i Patofizjologii Rosyjskiej Akademii Nauk Medycznych, Moskwa; Instytut Kardiologii Klinicznej. A.L. Myasnikova FGBU RKNPK Ministerstwa Zdrowia i Rozwoju Społecznego Federacji Rosyjskiej (czasopismo „Biuletyn Kardiologiczny” nr 1, 2012) [czytaj];

artykuł "Mitochondrialne DNA i ludzka patologia dziedziczna" N.S. Prochorowa, LA Demidenko; Zakład Biologii Medycznej, Instytucja Państwowa „Krymski Państwowy Uniwersytet Medyczny im. I.I. SI. Georgievsky”, Symferopol (czasopismo „Biuletyn Medyczny i Biologiczny Taurydów” nr 4, 2010) [czytaj];

artykuł „Genom mitochondrialny a choroby mitochondrialne człowieka” I.O. Mazunin, N.V. Wołodko, E.B. Starikowskaja, R.I. Sukernik; Instytut Biologii Chemicznej i Medycyny Podstawowej, Oddział Syberyjski Rosyjskiej Akademii Nauk, Nowosybirsk (czasopismo „Biologia Molekularna” nr 5, 2010) [czytaj];

artykuł „Perspektywy medycyny mitochondrialnej” autorstwa D.B. Zorow, N.K. Isajew, E.Ju. Płotnikow, D.N. Silaczow, L.D. Zorova, I.B. mgr Pevzner Morosanova, SS Yankauskas, SD Zorow, W.A. Babenko; Uniwersytet Państwowy w Moskwie Śr. Łomonosow, Instytut Biologii Fizycznej i Chemicznej im. A.I. JAKIŚ. Belozersky, Instytut Badawczy Mitoinżynierii, Centrum Badań Laserowych, Wydział Bioinżynierii i Bioinformatyki; Rosyjski Narodowy Uniwersytet Medyczny. N.I. Pirogov (magazyn „Biochemia” nr 9, 2013) [czytaj];

artykuł „Udar mózgu w chorobach mitochondrialnych” N.V. Pizow; Klinika Chorób Nerwowych z kursami neurochirurgii i genetyki medycznej, SBEI HPE „Państwowa Akademia Medyczna w Jarosławiu” (czasopismo „Neurologia, Neuropsychiatria, Psychosomatyka” nr 2, 2012) [czytaj];

artykuł "Diagnostyka i profilaktyka chorób mitochondrialnych kodowanych jądrowo u dzieci" E.A. Nikołajew; Research Clinical Institute of Pediatrics, Moskwa (czasopismo „Rosyjski Biuletyn Perinatologii i Pediatrii” nr 2, 2014) [czytaj];

artykuł „Padaczka u dzieci z chorobami mitochondrialnymi: cechy diagnozy i leczenia” Zavadenko N.N., Kholin A.A.; GBOU VPO Rosyjski Narodowy Uniwersytet Medyczny. N.I. Pirogov Ministerstwa Zdrowia i Rozwoju Społecznego Rosji, Moskwa (Dziennik „Padaczka i stany napadowe” nr 2, 2012) [czytaj];

artykuł „Patologia mitochondrialna i problemy patogenezy zaburzeń psychicznych” autorstwa V.S. Suchorukow; Moskiewski Instytut Badawczy Pediatrii i Chirurgii Dziecięcej Rosmedtechnologii (Journal of Neurology and Psychiatry, No. 6, 2008) [czytaj];

artykuł „Algorytm do diagnostyki encefalomiopatii mitochondrialnych” S.N. Illarioskin (magazyn o chorobach nerwowych nr 3, 2007) [czytaj];

artykuł „Aktualne problemy leczenia zaburzeń mitochondrialnych” autorstwa V.S. Suchorukow; Federalna Państwowa Instytucja Budżetowa „Moskiewski Instytut Badawczy Pediatrii i Chirurgii Dziecięcej” Ministerstwa Zdrowia Rosji (dziennik „Skuteczna farmakoterapia. Pediatria” nr 4, 2012 [czytaj];

artykuł „Leukoencefalopatia z dominującym uszkodzeniem pnia mózgu, rdzenia kręgowego i zwiększonym poziomem mleczanu w spektroskopii MR (obserwacja kliniczna)” V.I. Guzewa, E. A. Efet, O. M. Nikołajewa; St. Petersburg Pediatric Medical University, St. Petersburg, Rosja (czasopismo „Neurochirurgia i neurologia dzieciństwa” nr 1, 2013) [czytaj];

pomoc dydaktyczna dla studentów III roku wydziału diagnostyki medycznej uczelni medycznych „Dziedziczne choroby mitochondrialne” T.S. Ugolnik, I.V. Manaenkova; Placówka edukacyjna „Homelski Państwowy Uniwersytet Medyczny”, Zakład Fizjologii Patologicznej, 2012 [czytaj];

szybki: Choroby mitochondrialne(neurodegeneracja) - do serwisu z 17 linkami do źródeł (artykuły, prezentacje itp.).

© Laesus De Liro

Jeszcze nie tak dawno zagadnienia dysfunkcji mitochondriów były przedmiotem zainteresowania jedynie badaczy i indywidualnych lekarzy prowadzących. Od jakiegoś czasu coraz więcej o tym mówią lekarze stosujący podejście biomedyczne oraz rodzice dzieci z ASD.

Kompleks mitochondrialny to część komórek odpowiedzialna za produkcję energii. Dysfunkcja mitochondriów jest postrzegana jako jedna z możliwych przyczyn wielu przejawów autyzmu.

Od razu zauważam, że jest po prostu ogromna ilość danych o mitochondriach, które trzeba usystematyzować, uogólnić i stworzyć działający model. Genetyka, złożone reakcje chemiczne, ruch elektronów i przepuszczalność błon komórkowych – wszystkie te zagadnienia dotyczą problemu sprawności funkcjonowania mitochondriów u pacjentów z ASD.

Wiele dzieci z autyzmem ma podobne objawy, które mogą być spowodowane: niewystarczająca energia komórki:

• Niska aktywność mięśni gładkich. Jest to szczególnie szkodliwe dla pracy przewodu pokarmowego, co prowadzi do refluksu (cofania się treści żołądkowej do przełyku), dyskinez, zaparć i przerostu drożdżaków z powodu długiego przebywania pokarmu w jelitach.
• Ogólne osłabienie mięśni. Prowadzi to do niezdarności i słabych zdolności motorycznych, co z kolei powoduje opóźnienia rozwojowe.
• Zmniejszona skuteczność detoksykacji organizmu. Narządy wykonujące detoksykację, takie jak wątroba, wymagają bardzo dużej ilości energii. . Jeśli nie, to nie wszystkie toksyny zostaną przetworzone. W efekcie organizm jest coraz bardziej zatruwany, a potencjalnie szkodliwe substancje, które pojawiają się w pożywieniu i wodzie, działają nieoczekiwanie silnie.
• Niewystarczający dopływ energii do układu nerwowego. Prowadzi to do zniekształcenia sygnałów w układzie sensorycznym. Gdy impulsy nerwowe z mózgu do mięśni przechodzą z dużym trudem, dodatkowo utrudnia to płynność i wyrazistość ruchów.
• Zmniejszony potencjał energetyczny komórek mózgowych. Mózg pozbawiony dostatecznej energii nie będzie w stanie w pełni wykonywać swoich funkcji: wytwarzać i absorbować neuroprzekaźniki, hodować nowe komórki, pozbywać się starych, przekazywać sygnały. W efekcie można zaobserwować problemy z pamięcią i koncentracją.

Jeśli dziecko wykazuje wymienione objawy, wtedy zadaniem lekarza jest sprawdzenie funkcjonowania wszystkich układów organizmu i podjęcie decyzji, czy konieczne są badania laboratoryjne funkcji mitochondriów.

Przeczytaj także Wpływ diety na przebieg autyzmu: gdzie i jak szukać szans na poprawę

Można przypuszczać, że nie wszystkie stany towarzyszące ASD są nieodwracalne. Nasycenie pewnych niedoborów, w tym dysfunkcji mitochondriów, dostarczy organizmowi dziecka energii, której bardzo mu brakuje.

Dzięki temu będziemy mogli zaobserwować poprawę funkcjonowania prawie wszystkich układów organizmu, co zwiększy zdolność uczenia się pacjenta i ułatwi jego integrację ze społeczeństwem.

Lista czynników i substancji prowadzących do pogorszenia funkcjonowania mitochondriów:

• infekcje, zwłaszcza wirusowe;
• proces zapalny;
• ciepło;
• odwodnienie;
• przedłużający się głód;
• ekstremalne ciepło lub zimno;

• paracetamol;
• Niesteroidowe leki przeciwzapalne;
• leki przeciwpsychotyczne;
• antydepresanty;
• leki przeciwpadaczkowe;
• znieczulenie;
• metale ciężkie;
• insektycydy;
• palić papierosy.

Rodzice dzieci z ASD powinni unikać:

1. Spożywanie alkoholu przez dzieci
2. Trzymanie dzieci w pobliżu dymu papierosowego
3. Spożywanie posiłków z glutaminianem sodu (prawie wszystkie przetworzone produkty spożywcze, które można znaleźć na półkach supermarketów)
4. Stosowanie paracetamolu z wysoką gorączką (zamiast tego weź ibuprofen, co jest bezpieczniejsze)
5. Przyjmowanie leków przeciwpsychotycznych.

Oto lista antybiotyki które zaburzają funkcjonowanie układu mitochondrialnego:

• Linezolid
• Ryfampicyna
• Tetracyklina
• chloramfenikol
• Imipenem
• Penicylina
• Cefalosporyny

• Chinolony (cyprofloksacyna, lewofloksacyna, ofloksacyna)
• Makrolidy (azytromycyna, klarytromycyna, erytromycyna)
• Sulfanilamid kotrimoksazol

Zaburzenia mitochondrialne najlepiej leczyć za pomocą:

1. Dieta ketogeniczna (wysokotłuszczowa, odpowiednia ilość białka, niskowęglowodanowa)
2. Stosowanie witamin i suplementów diety w celu naprawienia sytuacji:

• Witamina B12 w postaci zastrzyków podskórnych
• Kompleks witamin z grupy B, takich jak B-50. Są to wszystkie witaminy z grupy B w ilości 50 mg każda
• S-adenozylometionina (SAM, ademetionina)
• L-cysteina i glutation
• koenzym Q10
• Ekstrakt z miłorzębu dwuklapowego
• Kompleksy przeciwutleniaczy, w skład których wchodzą witaminy A, C, E oraz minerały selen i cynk

Lekarze zaczęli obserwować, jak w XX wieku objawiają się choroby mitochondrialne. Próbując ustalić, co może być przyczyną którejkolwiek z chorób mitochondrialnych, eksperci zidentyfikowali ponad 50 rodzajów chorób, które są związane z zaburzeniami wpływającymi na mitochondria.

W zależności od przyczyn istnieją trzy główne podgrupy chorób mitochondrialnych, a mianowicie:

• Choroby spowodowane mutacjami w mitochondrialnym DNA. Takie wady są związane z mutacją punktową różnych elementów i są dziedziczone głównie od matki. Ponadto zwichnięcie strukturalne może powodować chorobę. Ta kategoria chorób obejmuje takie dziedziczne zespoły Kearns-Sayre, Pearsona, Lebera itp.
• Choroby wywołane defektami na poziomie jądrowego DNA. Mutacje prowadzą do zaburzenia funkcji mitochondriów. Ponadto mogą powodować negatywne zmiany w enzymach biorących udział w cyklicznym procesie biochemicznym, w szczególności zaopatrywaniu komórek w tlen. Należą do nich zespoły Lufta i Alpersa, choroby cukrzycowe itp.
• Choroby wywołane defektami na poziomie jądrowego DNA i w efekcie powodujące wtórną deformację mitochondrialnego DNA. Lista zmian wtórnych obejmuje niewydolność i zespoły wątroby, takie jak zidentyfikowany przez De Toni-Debre-Fanconiego.

Objawy

Przez długi czas mutacje, aw konsekwencji choroby mitochondrialne, mogą nie objawiać się u małoletniego pacjenta. Jednak z biegiem czasu narasta nagromadzenie niezdrowych organelli, w wyniku czego zaczynają pojawiać się pierwsze oznaki konkretnej choroby.

Ponieważ choroby grupy mitochondrialnej reprezentują całą grupę patologii, objawy tych chorób różnią się znacznie w zależności od tego, które narządy i układy ciała dziecka zostały uszkodzone. Biorąc pod uwagę związek między defektami mitochondrialnymi a funkcją energetyczną, można zidentyfikować szczególną podatność na uszkodzenia układu nerwowego i mięśniowego.

Wśród charakterystycznych objawów patologii układu mięśniowego można wyróżnić:

• Ograniczenie lub całkowity brak aktywności ruchowej z powodu niemożności wykonywania normalnych czynności z powodu osłabienia mięśni lub, jak nazywa się ten stan, miopatii.
• Obniżone ciśnienie krwi.
• Zespół bólowy lub skurcze mięśni, którym towarzyszy silny ból.

U dzieci objawiają się przede wszystkim bóle głowy, intensywne i nawracające wymioty oraz osłabienie po minimalnym wysiłku fizycznym.

Jeśli mówimy o uszkodzeniu układu nerwowego, mają miejsce następujące objawy:

• opóźnienie w rozwoju psychomotorycznym;
• niezdolność do wykonywania czynności, z którymi wcześniej radziło sobie dziecko - regres rozwojowy;
• drgawki;
• okresowe objawy bezdechu i przyspieszonego oddechu;
• częsta utrata przytomności i zapadnięcie w śpiączkę;
• zmiany w poziomie równowagi kwasowo-zasadowej;
• zmiana chodu.

U starszych dzieci można zauważyć drętwienie, paraliż, utratę czucia, drgawki przypominające udar, patologie w postaci mimowolnych ruchów itp.

Zaangażowanie narządów zmysłów wyraża się pogorszeniem funkcji wzroku, opadaniem powiek, zaćmą, wadami siatkówki i pola widzenia, upośledzeniem słuchu lub całkowitą głuchotą o charakterze neurosensorycznym. Uszkodzenie narządów w ciele dziecka objawia się problemami z sercem, wątrobą, nerkami, trzustką. Jeśli chodzi o choroby związane z układem hormonalnym, należy zauważyć:

• opóźnienie wzrostu i rozwoju płciowego,
• zmniejszona produkcja glukozy przez organizm,
• dysfunkcja tarczycy,
• inne problemy metaboliczne.

Diagnoza chorób mitochondrialnych u dziecka

W celu zdiagnozowania obecności chorób mitochondrialnych lekarz bada historię, przeprowadza badanie fizykalne, badając przede wszystkim siłę i wytrzymałość dziecka. Dodatkowo zleca się badanie neuropatologa obejmujące ocenę wzroku, odruchów, mowy i zdolności poznawczych. Za pomocą specjalistycznych analiz - biopsji mięśnia, MRS i tak dalej - potwierdzam podejrzenia. Obrazowanie metodą rezonansu komputerowego i magnetycznego oraz diagnostykę DNA wykonuje się również po konsultacji z genetykami.

Komplikacje

Niebezpieczeństwo defektów mitochondrialnych zależy od rodzaju choroby. Na przykład, gdy układ mięśniowy jest uszkodzony, następuje całkowity paraliż i niepełnosprawność, w tym regresja intelektualna.

Leczenie

Co możesz zrobić

Pierwsza pomoc od rodziców zależy od tego, jakie dokładnie są objawy choroby. W każdym razie, jeśli istnieje najmniejsze podejrzenie i odchylenia od normy, należy skontaktować się ze specjalistą i dowiedzieć się, co zrobić z chorobą, jeśli jest obecna.

Co robi lekarz

Bez względu na rodzaj choroby można ją leczyć podając leki normalizujące metabolizm energetyczny. Ponadto dziecku przepisuje się leczenie objawowe i specjalistyczne w sposób przewidziany dla konkretnej choroby. Ćwiczenia fizyczne i zabiegi fizjoterapeutyczne pomagają szybciej leczyć patologie lub normalizować stan pacjenta.

Zapobieganie

Chorobom mitochondrialnym nie można zapobiegać, ponieważ występują one na poziomie genetycznym. Jedynym sposobem na zminimalizowanie ryzyka jest prowadzenie zdrowego stylu życia bez złych nawyków.

Słowa kluczowe

DZIECI NOWORODKA / CHOROBA MITOCHONDRIALNA / ZESPÓŁ ODPADÓW MTDNA TYP 13 / encefalomiopatia/ KWARZYCA MLECZANOWA / MANIFESTACJA NEONATALNA/ GEN FBXL4 / NOWORODKI / ZABURZENIA MITOCHONDRIALNE / 13 ZESPÓŁ WYCZERPANIA TYPU MTDNA/ encefalomiopatia / kwasica mleczanowa / manifestacja noworodków / GEN FBXL4

adnotacja artykuł naukowy o medycynie klinicznej, autor pracy naukowej - Degtyareva A.V., Stepanova E.V., Itkis Yu.S., Dorofeeva E.I., Narogan M.V.

Obserwacja kliniczna dziecka z wczesną manifestacja noworodkowa rzadka dziedziczna choroba zespołu deplecji mitochondrialnego DNA (mtDNA) typu 13, potwierdzona laboratoryjnie w Rosji. Mutacje w genie FBXL4 powodują zaburzenia replikacji mtDNA oraz spadek aktywności mitochondrialnych kompleksów łańcucha oddechowego, co skutkuje naruszeniem stanu czynnościowego różnych narządów i układów, przede wszystkim układu mięśniowego i mózgu. Przedporodowo u dziecka zdiagnozowano wodonercze po prawej stronie, torbiele podwyściółkowe mózgu, częściową niedrożność jelit na tle wielowodzia. Stan gwałtownie się pogorszył pod koniec pierwszego dnia życia. Wystąpił zespół objawów klinicznych posocznicy, wyraźny zespół depresyjny, niedociśnienie mięśniowe, niewyrównana metaboliczna kwasica mleczanowa, wzrost stężenia markerów mitochondrialnych w osoczu krwi i moczu oraz zmiany w jądrach podstawy mózgu. Przeprowadzono diagnostykę różnicową z chorobami dziedzicznymi przebiegającymi według typu zespołu objawów „sepsopodobnych” z kwasicą mleczanową: grupa zaburzeń metabolicznych aminokwasów, kwasów organicznych, defekty β-oksydacji kwasów tłuszczowych, choroby mitochondrialne łańcuch oddechowy, choroba glikogenowa. zespół deplecji mtDNA typ 13 ma niekorzystne rokowanie, jednak trafna diagnoza jest niezmiernie ważna dla medycznego poradnictwa genetycznego i zapobiega ponownemu narodzinom chorego dziecka w rodzinie.

Powiązane tematy artykuły naukowe w medycynie klinicznej, autor pracy naukowej - Degtyareva A.V., Stepanova E.V., Itkis Yu.S., Dorofeeva E.I., Narogan M.V.

• Niedobór mitochondrialnej kinazy deoksyguanozynowej

  2009 / Degtyareva Anna Vladimirovna, Zacharova Jekaterina Yurievna, Cygankova Polina Georgievna, Chegletsova Elena Vladimirovna, Gotye Sergey Vladimirovich, Csirulnikova Olga Martenovna

• Podostre martwicze zapalenie mózgu i rdzenia. Obserwacje kliniczne

  2016 / Oniegin E.V., Berdovskaya A.N., Domarenko T.N., Danilova G.S., Motyuk I.N.

• Podostra martwicza encefalomiopatia

  2009 / Michajłowa Swietłana Witalijewna, Zacharowa Jekaterina Juriewna, Kharlamow Dmitrij Aleksiejewicz, Iljina Elena Stiepanowna, Suchorukow Władimir Siergiejewicz, Balina Elena Albertowna, Luzin Anatolij Władimirowicz, Cygankowa Polina Georgiewna

• Polimorfizm kliniczny mitochondrialnych encefalomiopatii spowodowany mutacjami w genie polimerazy gamma

  2012 / Michajłowa Swietłana Witalijewna, Zacharowa Jekaterina Jurjewna, Cygankowa Polina Georgiewna, Abrukowa Anna Wiktorowna, Politova Jekatierina Aleksiejewna, Bałabanowa Vera Antonidovna, Pechatnikova N.L., Savvin Dmitrich Alexandra Vardeny Pilelyevich, Savvin Dmitry Anatolyevich,

• Padaczka w zespole melas

  2009 / Mukhin K.Yu., Mironov M.B., Nikiforova N.V., Mikhailova S.V., Chadaev V.A., Alikhanov A.A., Ryzhkov B.N., Petrukhin A.S.

• Wartość diagnostyczna badania aktywności cytochemicznej enzymów w dziedzicznych chorobach mitochondrialnych

  2017 / Kazantseva I.A., Kotov S.V., Borodataya E.V., Sidorova O.P., Kotov A.S.

• Niedobór acylo-koenzymu dehydrogenazy bardzo długołańcuchowych kwasów tłuszczowych

  2014 / Degtyareva Anna Vladimirovna, Nikitina Irina Vladimirovna, Orlovskaya Irina Vladimirovna, Zacharova Jekaterina Yurievna, Baidakova Galina Viktorovna, Ionov Oleg Vadimovich, Amirkhanova Dzhenneta Yunusovna, Levadnaya Anna Wiktorowna

• Choroby mitochondrialne w dziecięcej praktyce neurologicznej (obserwacja kliniczna)

  2014 / Prygunova Tatiana Michajłowna, Radajewa Tatiana Michajłowna, Stiepanowa Elena Juriewna

• Udary w chorobach mitochondrialnych

  2012 / Pizova N.V.

• Rzadkie warianty mitochondrialnego DNA u dziecka z encefalomiopatią

  2016 / Woronkowa Anastazja Siergiejewna, Litwinova Natalia Aleksandrowna, Nikołajewa Jekaterina Aleksandrowna, Suchorukow Władimir Siergiejewicz

Artykuł przedstawia przypadek kliniczny wczesnego noworodka manifestującego się rzadką chorobą genetyczną zespołu deplecji mitochondrialnego DNA, potwierdzonym laboratoryjnie w Rosji. Mutacje FBXL4, kodujące sieroce mitochondrialne białko F-box, zaangażowane w utrzymanie mitochondrialnego DNA (mtDNA), ostatecznie prowadzące do zakłócenia replikacji mtDNA i zmniejszenia aktywności mitochondrialnych kompleksów łańcucha oddechowego. Jest przyczyną nieprawidłowości w tkankach dotkniętych klinicznie, przede wszystkim w układzie mięśniowym i mózgu. W naszym przypadku prenatalnie rozpoznano wodonercze prawe, torbiele podwyściółkowe mózgu, częściową niedrożność jelit z towarzyszącym wielowodziem. Stan dziecka przy urodzeniu był zadowalający i dramatycznie się pogorszył pod koniec pierwszego dnia życia. Obraz kliniczny obejmuje zespół objawów podobnych do sepsy, depresję noworodkową, hipotonię mięśniową, uporczywą niewyrównaną kwasicę mleczanową, wzrost stężenia markerów mitochondrialnych w osoczu krwi i moczu oraz zmiany w jądrach podstawnych mózgu. Obrazowanie mózgu za pomocą rezonansu magnetycznego (MRI) wykazało ogólną utratę objętości, szczególnie podkorowej i okołokomorowej istoty białej ze znaczącym nieprawidłowym sygnałem w obustronnych jądrach podstawy i pniu mózgu z towarzyszącą opóźnioną mielinizacją. Diagnostyka różnicowa została przeprowadzona z chorobami dziedzicznymi, które występują jako zespół objawów „sepsopodobnych”, któremu towarzyszy kwasica mleczanowa: grupa zaburzeń metabolicznych aminokwasów, kwasów organicznych, defekty ß-oksydacji kwasów tłuszczowych, zaburzenia łańcucha mitochondrialnego w układzie oddechowym i choroba spichrzania glikogenu. Diagnozę potwierdzono po analizie sekwencjonowania 62 genów mitochondrialnych metodą NGS (Next Generation Sequencing). Zgłoszona choroba ma niekorzystne rokowanie, jednak trafna diagnoza jest bardzo ważna w poradnictwie genetycznym i zapobiega ponownemu narodzinom chorego dziecka w rodzinie.

Tekst pracy naukowej na temat „Obserwacja kliniczna pacjenta z zespołem deplecji mitochondrialnego DNA”

Obserwacja kliniczna pacjenta z zespołem deplecji mitochondrialnego DNA

AV Degtyareva 1,3, E.V. Stepanova1, Yu.S. Itkis2, E.I. Dorofeeva1, M.V. Narogan1,3, LV Ushakova1, A.A. Puchkowa1, V.G. Byczenko1, P.G. Tsygankova2, T.D. Kryłowa2, I.O. Byczkow2

1FGBU „Centrum Naukowe Położnictwa, Ginekologii i Perinatologii im. akademika V.I. Kułakow» Ministerstwa Zdrowia Federacji Rosyjskiej, Moskwa;

2FGBNU „Medyczne Centrum Badań Genetycznych”, Moskwa;

3FGAOU HE Pierwszy Moskiewski Państwowy Uniwersytet Medyczny. ICH. Sechenov Ministerstwa Zdrowia Federacji Rosyjskiej, Moskwa, Rosja

Kliniczny przypadek wyczerpania mitochondrialnego DNA

AV Degtyareva 1,3, E.V. Stepanova1, Yu.S. Itkis2, E.I. Dorofeeva1, M.V. Narogan1,3,

LV Ushakova1, A.A. Puchkowa1, V.G. Byczenko1, P.G. Tsygankova2, T.D. Kryłowa2, I.O. Byczkow2

1"Centrum Badawcze Położnictwa, Ginekologii i Perinatologii" Ministerstwo Opieki Zdrowotnej Federacji Rosyjskiej 2FSBI "Centrum Badawcze Genetyki Medycznej"

3Pierwszy Moskiewski Państwowy Uniwersytet Medyczny I.M. Sieczenow Ministerstwa Zdrowia

W pracy przedstawiono obserwację kliniczną dziecka z wczesną noworodkową manifestacją rzadkiej choroby dziedzicznej - zespołu deplecji mitochondrialnego DNA (mtDNA) typu 13, potwierdzonego laboratoryjnie w Rosji. Mutacje w genie FBXL4 powodują zaburzenia replikacji mtDNA oraz spadek aktywności mitochondrialnych kompleksów łańcucha oddechowego, co skutkuje naruszeniem stanu czynnościowego różnych narządów i układów, przede wszystkim układu mięśniowego i mózgu. Przedporodowo u dziecka zdiagnozowano wodonercze po prawej stronie, torbiele podwyściółkowe mózgu, częściową niedrożność jelit na tle wielowodzia. Stan gwałtownie się pogorszył pod koniec pierwszego dnia życia. Wystąpił zespół objawów klinicznych sepsy, wyraźny zespół depresyjny, niedociśnienie mięśniowe, niewyrównana metaboliczna kwasica mleczanowa, wzrost stężenia markerów mitochondrialnych w osoczu krwi i moczu oraz zmiany w okolicy jąder podstawy mózgowy. Diagnostykę różnicową przeprowadzono z chorobami dziedzicznymi przebiegającymi według typu zespołu objawów „sepsopodobnych” z kwasicą mleczanową: grupa zaburzeń metabolicznych aminokwasów, kwasów organicznych, zaburzenia p-oksydacji kwasów tłuszczowych, choroby mitochondrialnego układu oddechowego łańcuch, choroba glikogenowa. Zespół zubożenia mtDNA typu 13 ma niekorzystne rokowanie, ale dokładna diagnoza jest niezwykle ważna dla medycznego poradnictwa genetycznego i pomaga zapobiegać ponownemu narodzinom chorego dziecka w rodzinie.

Słowa kluczowe: noworodki, choroba mitochondrialna, zespół deplecji mtDNA typu 13, encefalomiopatia, kwasica mleczanowa, objawy noworodkowe, gen FBXL4.

Do cytowania: Degtyareva A.V., Stepanova E.V., Itkis Yu.S., Dorofeeva E.I., Narogan M.V., Ushakova L.V., Puchkova A.A., Bychenko V.G., Tsygankova PG, Krylova T.D. Obserwacja kliniczna pacjenta z zespołem deplecji mitochondrialnego DNA. Rosvestn perinatol i pediatra 2017; 62:(5): 55-62. DOI: 10.21508/1027-4065-2017-62-5-55-62

Streszczenie: W artykule przedstawiono przypadek kliniczny wczesnego ujawnienia się u noworodków rzadkiej choroby genetycznej - zespołu deplecji mitochondrialnego DNA, potwierdzonego laboratoryjnie w Rosji. Mutacje FBXL4, kodujące sieroce mitochondrialne białko F-box, zaangażowane w utrzymanie mitochondrialnego DNA (mtDNA), ostatecznie prowadzące do zakłócenia replikacji mtDNA i zmniejszenia aktywności mitochondrialnych kompleksów łańcucha oddechowego. "Jest to przyczyną nieprawidłowości w tkankach zaatakowanych klinicznie, przede wszystkim układu mięśniowego i mózgu. W naszym przypadku wodonercze po prawej stronie, torbiele podwyściółkowe mózgu, częściowa niedrożność jelit z towarzyszącym wielowodziem zostały zdiagnozowane w okresie przedporodowym. poród był zadowalający i dramatycznie pogorszył się pod koniec pierwszego dnia życia. Obraz kliniczny obejmuje zespół objawów podobnych do sepsy, depresję noworodkową, hipotonię mięśniową, uporczywą niewyrównaną kwasicę mleczanową, wzrost stężenia markerów mitochondrialnych w osoczu krwi i moczu oraz zmiany w jądrach podstawnych mózgu. Obrazowanie mózgu za pomocą rezonansu magnetycznego (MRI) wykazało ogólną utratę objętości, szczególnie podkorowej i okołokomorowej istoty białej ze znaczącym nieprawidłowym sygnałem w obustronnych jądrach podstawy i pniu mózgu z towarzyszącą opóźnioną mielinizacją. Diagnostyka różnicowa została przeprowadzona z chorobami dziedzicznymi, które występują jako zespół objawów „sepsopodobnych”, któremu towarzyszy kwasica mleczanowa: grupa zaburzeń metabolicznych aminokwasów, kwasów organicznych, defekty p-oksydacji kwasów tłuszczowych, zaburzenia łańcucha mitochondrialnego w układzie oddechowym i choroba spichrzania glikogenu. Diagnozę potwierdzono po analizie sekwencjonowania 62 genów mitochondrialnych metodą NGS (Next Generation Sequencing). Zgłoszona choroba ma niekorzystne rokowanie, jednak trafna diagnoza jest bardzo ważna w poradnictwie genetycznym i zapobiega ponownemu narodzinom chorego dziecka w rodzinie.

Słowa kluczowe: noworodki, zaburzenia mitochondrialne, zespół deplecji mtDNA typu 13, encefalomiopatia, kwasica mleczanowa, objawy noworodkowe, gen FBXL4.

Do cytowania: Degtyareva A.V., Stepanova E.V., Itkis Yu.S., Dorofeeva E.I., Narogan M.V., Ushakova L.V., Puchkova A.A., Bychenko V.G., Tsygankova P.G., Krylova T.D., Bychkov I. Kliniczny przypadek encefalomiopatii mitochondrialnej deplecji DNA związanej z FBXL4. Ros Vestn Perinatal i Pediatr 2017; 62:(5): 55-62 (w języku rosyjskim). DOI: 10.21508/1027-4065-2017-62-5-55-62

Mitochondria to złożone organelle, które odgrywają kluczową rolę w homeostazie komórek. Są głównym źródłem wewnątrzkomórkowej syntezy energii w postaci cząsteczek ATP, są ściśle zaangażowane w procesy metabolizmu wapnia i wolnych rodników, a także uczestniczą w apoptozie. W chorobach mitochondrialnych w pierwszej kolejności cierpią tkanki i narządy, szczególnie zależne od tych funkcji – dotyczy to przede wszystkim tkanki mięśniowej, układu nerwowego i hormonalnego. Większość chorób mitochondrialnych ma charakter postępujący, prowadząc do niepełnosprawności i przedwczesnej śmierci. Choroby te są klasyfikowane jako rzadkie, z częstością występowania 1-1,5: 5000-10 000 noworodków. Choroby mitochondrialne mogą rozwijać się w każdym wieku. Około 30% przypadków objawia się w okresie noworodkowym.

Zgodnie z klasyfikacją genetyczną choroby mitochondrialne dzielą się na następujące grupy: 1) choroby wywołane mutacjami punktowymi w mitochondrialnym DNA (mtDNA) – zespoły MELAS, MERRF, LHON, NARP z dziedziczeniem matczynym; 2) choroby wywołane pojedynczymi dużymi rearanżacjami mtDNA - zespoły Kearnsa-Sayre'a, Pearsona; 3) choroby związane z mutacjami w genach jądrowych białek strukturalnych

Adres do korespondencji: Degtyareva Anna Vladimirovna - doktor nauk medycznych, kierownik. w pracy klinicznej Oddziału Neonatologii i Pediatrii Centrum Naukowego Położnictwa, Ginekologii i Perinatologii im. akademika V.I. Kułakowa, prof. Oddział Neonatologii I Moskiewskiego Państwowego Uniwersytetu Medycznego im. I.M. Sechenova, ORCID 0000-0003-0822-751X Stepanova Ekaterina Vladimirovna - Rezydentka Centrum Naukowego Położnictwa, Ginekologii i Perinatologii im. akademika V.I. Kułakowa Dorofeeva Elena Igorevna - kandydatka nauk medycznych, kierownik. o pracy klinicznej Oddziału Chirurgii Noworodkowej Oddziału Neonatologii i Pediatrii Centrum Naukowego Położnictwa, Ginekologii i Perinatologii im. akademika V.I. Kułakowa

Narogan Marina Viktorovna - doktor nauk medycznych, wiodący profesor naukowy współpracownik Klinika Patologii Noworodków i Wcześniaków, Klinika Neonatologii i Pediatrii, Centrum Naukowe Położnictwa, Ginekologii i Perinatologii im. akademika V.I. Kułakowa, prof. Oddział Neonatologii I Moskiewskiego Państwowego Uniwersytetu Medycznego im. I.M. Sechenova Ushakova Lyubov Vitalievna - dr hab. Kułakowa

Puchkova Anna Aleksandrowna - dr hab., kierownik. o pracy klinicznej Pediatrycznego Oddziału Doradztwa Naukowego Oddziału Neonatologii i Pediatrii Centrum Naukowego Położnictwa, Ginekologii i Perinatologii im. akademika V.I. Kułakowa

Bychenko Vladimir Gennadievich - kandydat nauk medycznych, kierownik. Zakład Diagnostyki Radiacyjnej Centrum Naukowego Położnictwa, Ginekologii i Perinatologii im. Akademika V.I. Kułakowa 117997 Moskwa, ul. akademik Oparin, 4

Itkis Julia Sergeevna - Badacz Medycznego Centrum Badań Genetycznych

Krylova Tatyana Dmitrievna - genetyk laboratoryjny Medycznego Centrum Badań Genetycznych

Bychkov Igor Olegovich - doktorant Centrum Badań Genetycznych Medycznych 115478 Moskwa, ul. Moskworieczje, 1

łańcuch oddechowy mitochondriów, - zespół Lee, encefalomiopatia dziecięca dziedziczona autosomalnie recesywnie lub sprzężona z chromosomem X; 4) choroby związane z mutacjami w genach jądrowych białek nośnikowych i asemblerów mitochondrialnych kompleksów łańcucha oddechowego – zespół Lee, encefalomiopatie dziecięce dziedziczone autosomalnie recesywnie lub sprzężone z chromosomem X; 5) choroby związane z mutacjami w genach jądrowych odpowiedzialnych za biogenezę mtDNA - zespoły deplecji mtDNA z dziedziczeniem autosomalnym recesywnym.

Jednym z biochemicznych markerów chorób mitochondrialnych jest wysoki poziom mleczanu we krwi. Kompleks pierwszej linii badań z podejrzeniem tej patologii obejmuje oznaczenie zawartości aminokwasów, acylokarnityn i kwasów organicznych we krwi i moczu. W ostatnim czasie wykazano dużą zawartość informacyjną oznaczania stężenia czynnika wzrostu fibroblastów 21 (FGF-21) i czynnika różnicowania wzrostu-15 (GDF-15) w osoczu krwi, jednak skuteczność tych biomarkerów w diagnostyce niektórych grup chorób mitochondrialnych jest nadal badana przez różne grupy naukowców. Ostateczną diagnozę choroby mitochondrialnej ustala się na podstawie wyników molekularnej analizy genetycznej.

Obecnie nie ma skutecznych metod leczenia chorób mitochondrialnych. Terapia objawowa opiera się na stosowaniu leków metabolicznych, takich jak koenzym Q10, monohydrat kreatyny, ryboflawina, idebenon, karnityna, tiamina, dichlorooctan itp. Szczególną uwagę należy również zwrócić na żywienie dziecka; Wskazane jest przejście na dietę niskobiałkową z dużą ilością tłuszczu w diecie. Stosowanie preparatów kwasu walproinowego i barbituranów jest przeciwwskazane.

Zespoły deplecji mtDNA są klinicznie i genetycznie heterogenną grupą chorób dziedziczonych w sposób autosomalny recesywny i spowodowanych mutacjami w genach, które utrzymują biogenezę i integralność mtDNA. Przy takich zaburzeniach następuje spadek liczby kopii mtDNA w dotkniętych tkankach bez jego strukturalnego uszkodzenia. Klinicznie wyróżnia się trzy postacie chorób związanych ze spadkiem liczby kopii mtDNA: encefalomiopatię, miopatyczną i wątrobowo-mózgową. Znanych jest 20 genów, których mutacje prowadzą do zespołów wyniszczenia mtDNA: ABAT, AGK, C10ORF2 (TWINKLE), DGUOK, DNA2, FBXL4, MFN2, MGME1, MPV17, OPA1, POLG, POLG2, RNASEH1, RRM2B, SLC25A4, SUCLA2, SUCLG1, TFAM, TK2, TYMP. W Federacji Rosyjskiej w laboratorium dziedzicznych chorób metabolicznych Medical Genetic Research Center zdiagnozowano 36 pacjentów

Zespoły deplecji mtDNA z mutacjami w genach POLG i TWINKLE (postaci encefalomiopatii i wątrobowo-mózgowej), DGUOK i MPV17 (postaci wątrobowo-mózgowej), które stanowiły znaczny odsetek wszystkich wczesnych postaci chorób mitochondrialnych.

Zespół deplecji mtDNA typu 13 (MIM http://omim.org/entry/615471 615471) jest spowodowany mutacjami w genie FBXL4 zlokalizowanym w locus 6q16.1-q16.27. Zaburzenie to zostało po raz pierwszy opisane w 2013 roku przez P.E. Bonnen i X. Gai niezależnie. Obecnie na świecie znanych jest 26 obserwacji klinicznych. Gen FBXL4 koduje białko (F-box i białko bogate w leucynę 4 powtórzenia), które jest jedną z podjednostek kompleksu ligazy białkowej ubikwityny, która odgrywa ważną rolę w niszczeniu wadliwych białek w komórce, w tym w mitochondriach. Dokładna funkcja tego białka nie jest znana, ale wykazano w hodowlach komórkowych, że synteza ATP jest zmniejszona w uszkodzonych mitochondriach, a replikacja mtDNA jest zaburzona, co ostatecznie prowadzi do zmniejszenia jego kopii w tkankach i przerwania mitochondrialnego łańcucha oddechowego.

W większości przypadków zespół deplecji mtDNA typu 13 objawia się we wczesnym okresie noworodkowym, opisano jednak obserwacje późniejszej manifestacji do 24 miesiąca życia. Choroba charakteryzuje się encefalopatią, niedociśnieniem, kwasicą mleczanową, poważnym opóźnieniem rozwoju i zmianami w jądrach podstawy w obrazowaniu metodą rezonansu magnetycznego (MRI) mózgu. Według M. Huemera i in. u pacjentów z mutacjami w genie FBXL4 obserwuje się takie cechy fenotypowe jak wąska i długa twarz, wystające czoło, grube brwi, wąskie szpary powiekowe, szeroki grzbiet nosa, nos siodłowy.

Rokowanie jest wyjątkowo niekorzystne, większość dzieci umiera w pierwszych 4 latach życia. Ustalenie diagnozy choroby ma ogromne znaczenie dla medycznej porady genetycznej i ewentualnej diagnozy prenatalnej.

Celem niniejszej publikacji jest przedstawienie klinicznego opisu pierwszego rosyjskiego przypadku choroby mitochondrialnej wywołanej mutacjami w genie FBXL4 oraz określenie głównych kryteriów diagnozowania zespołów deplecji mtDNA we wczesnym dzieciństwie.

Pacjent i metody badawcze

Dziewczynka urodziła się i była pod dynamiczną obserwacją w Naukowym Centrum Położnictwa, Ginekologii i Perinatologii im. W I. Kułakow. Przeprowadzono kompleksowe badanie kliniczne, laboratoryjne i instrumentalne. W laboratorium genetyki dziedzicznej przeprowadzono pewne badania biochemiczne i molekularne

choroby metaboliczne Centrum Genetyki Medycznej. Kwasy organiczne w moczu analizowano metodą chromatografii gazowej z detekcją spektrometrii masowej jako etery trimetylosililowe. Przygotowanie próbki przeprowadzono zgodnie z metodą zaproponowaną przez M. Lefevere. Analizę przeprowadzono na aparacie 7890A/5975C (Agilent Technologies, USA) z kolumną HP-5MS (30 m*0,25 mm*4 µm). Otrzymane wyniki obliczono metodą wzorca wewnętrznego. Stężenie markerów mitochondrialnych FGF-21 i GDF-15 w osoczu krwi mierzono zestawami opartymi na metodzie immunoenzymatycznej firmy Biovendor (Czechy).

DNA wyizolowano z pełnej krwi przy użyciu zestawów Isogene (Rosja) zgodnie z protokołem producenta. Sekwencjonowanie 62 jądrowych genów mitochondrialnych przeprowadzono metodą NGS (Next Generation Sequencing) na urządzeniu Ion Torrent PGM™ System for Next-Generation Sequencing (Life Technologies, Thermo Fisher Scientific). Przygotowanie próbki próbek DNA przeprowadzono za pomocą zestawu odczynników Ion AmpliSeq™ Library Kit 2.0 (projektowanie puli starterów przy użyciu technologii Ampliseq) zgodnie z protokołem producenta. Wizualizację dopasowania zsekwencjonowanych fragmentów do sekwencji referencyjnej genomu ludzkiego Human.hg19 przeprowadzono przy użyciu programu IGV. Wykryte zmiany zostały opatrzone adnotacjami za pomocą programu ANNOVAR. Predyktywne znaczenie funkcjonalne wcześniej nieopisanych mutacji zostało ocenione przy użyciu różnych programów typu open source (PolyPhen2, Mutation tester, SIFT). Zidentyfikowane warianty przefiltrowano według częstości występowania w populacjach zgodnie z danymi prezentowanymi w otwartych bazach ExAc, 1000 genomów itp. Substytucje nukleotydowe inne niż sekwencja referencyjna analizowano w bazach mutacji i polimorfizmów (HGMD, Ensemble, dbSNP) . Mutacje zidentyfikowane w genie FBXL4 zostały zweryfikowane przez bezpośrednie automatyczne sekwencjonowanie na analizatorze genetycznym ABI3500 (Thermo Fisher Scientific) przy użyciu BigDye Terminator v.1.1 (Thermo Fisher Scientific). Do reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) użyto specyficznych starterów oligonukleotydowych (sekwencja dostępna na żądanie). Zestawienie i porównanie danych przeprowadzono zgodnie z transkrypcją NM_012160.

Obserwacja kliniczna

Dziecko urodziło się w terminie u zdrowej somatycznie kobiety z obciążoną historią położniczo-ginekologiczną i zakaźną. Małżeństwo nie jest spokrewnione. Rodzina ma jedno zdrowe dziecko. Ciąża przebiegała z zaostrzeniem zapalenia jajowodów w I trymestrze, zapaleniem miazgi ze wzrostem temperatury do 38°C i zakończyła się samoistnym porodem.

Dziecko urodziło się z masą ciała 2555 g, długością 49 cm, oceną Apgar 8/9 punktów. Przedporodowo rozpoznano wodonercze po stronie prawej, torbiele podwyściółkowe mózgu oraz częściową niedrożność jelit na tle wielowodzia. Pierwsze godziny życia miały charakter „okresu względnego dobrostanu”, jednak ze względu na patologię przedporodową dziecko zostało przeniesione na badania na oddział chirurgii, resuscytacji i intensywnej opieki noworodkowej.

Pod koniec pierwszego dnia życia stan gwałtownie się pogorszył, wystąpił wyraźny zespół depresyjny, niedociśnienie mięśniowe, pogorszenie hemodynamiczne, zaburzenia oddechowe wymagające sztucznej wentylacji płuc. Na podstawie stanu kwasowo-zasadowego i składu gazowego krwi stwierdzono zdekompensowaną metaboliczną kwasicę mleczanową (pH 7,12; pCO2 12,6 mm Hg; pO2 71,9 mm Hg; BE -24,2 mmol/l; mleczan 19,0 mmol/l). Na podstawie danych historycznych nie można było wykluczyć obecności procesu zakaźnego, a dziecku przepisano terapię przeciwbakteryjną i immunomodulującą. W analizie klinicznej krwi odnotowano leukocytozę z przesunięciem wzoru w lewo, obniżeniem zawartości hemoglobiny, poziom płytek krwi mieścił się w wartościach normatywnych (tabela 1).

Jednocześnie markery ogólnoustrojowej odpowiedzi zapalnej (białko C-reaktywne i prokalcytonina) były ujemne (odpowiednio 0,24 mg/l i 10 ng/ml), a podczas badania nie wykryto ognisk infekcji. W celu wykluczenia wrodzonego zapalenia płuc wykonano badanie rentgenowskie, którego wyniki nie ujawniły konkretnych zmian. Na podstawie wyników nakłucia lędźwiowego wykluczono zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych. Analiza kliniczna moczu również nie wykazała

Tabela 1. Parametry klinicznego badania krwi pacjenta

zmiany zapalne. Ponadto uzyskano ujemne wyniki posiewów mikrobiologicznych krwi i moczu, zeskrobin z gardła oraz badania serologiczne w kierunku zakażenia TORCH.

W stanie neurologicznym wystąpił zespół ciężkiej depresji, nie występowały objawy oponowe, występował okresowy zez rozbieżny, ciężkie rozlane niedociśnienie mięśniowe. Terapia obejmowała metabolizowany lek megluminian sodu bursztynian (Reamberin) oraz stymulator syntezy acetylocholiny i fosfatydylocholiny – alfossceran choliny (Cholitilin). Na tle trwającego leczenia postsyndromicznego odnotowano pozytywną dynamikę, do 8. dnia życia dziecko zostało wycofane z terapii oddechowej. Zgodnie z wynikami klinicznego badania krwi zmiany zapalne ustały, markery zapalenia białko C-reaktywne i prokalcytonina pozostały w normie. U dziecka zachowały się jednak objawy ciężkiego niedociśnienia mięśniowego, zespołu depresji OUN i kwasicy mleczanowej (9,5 mmol/l). Należy zauważyć, że poziom mleczanu nigdy nie obniżył się do wartości prawidłowych i falował przez cały okres pobytu w szpitalu (ryc. 1).

Rozbieżność pomiędzy klinicznymi objawami sepsy z ciężką niewyrównaną kwasicą mleczanową, ujemnymi markerami ogólnoustrojowej odpowiedzi zapalnej i odpowiedzią na leczenie była powodem podejrzenia zaburzeń metabolicznych. Zakres diagnostyki różnicowej obejmował choroby występujące w okresie noworodkowym w zależności od typu zespołu objawów „sepsopodobnych” z kwasicą mleczanową: grupa zaburzeń metabolicznych aminokwasów, kwasów organicznych, zaburzenia p-oksydacji kwasów tłuszczowych, układu oddechowego choroby

Parametry 2 dzień życia Wartości referencyjne (1-7 dzień życia) 8 dzień życia Wartości referencyjne (> 7 dni życia)

Erytrocyty, -1012/l 4,03 5,5-7,0 4,42 4,5-5,5

Hemoglobina, g/l 137 160-190 136 180-240

Hematokryt 40,9 0,41-0,56 38,1 0,41-0,56

Płytki krwi, -199/l 236 218-419 213 218-419

Leukocyty, -109/l 49,11 5,0-30,0 11,72 8,5-14,0

Neutrofile, -109/l 27,514 6-20 4,342 1,5 - 7,0

Indeks neutrofili 0,44< 0,25 0,16 < 0,25

Pchnięcie, % 16 5-12 6 1-5

Segmentowane, % 56 50-70 47 35-55

Eozynofile, % 0 1-4 3 1-4

Monocyty, % 9 4-10 18 6-14

Limfocyty, % 10 16-32 32 30-50

choroba łańcucha mitochondrialnego i glikogenu typu I (choroba Girke'a). Dziecko zostało przebadane z karmieniem, polegające na określeniu stężenia glukozy i mleczanów we krwi po przerwie głodowej i 20-30 minutach po karmieniu. Zgodnie z wynikami tego badania poziom glukozy we krwi na czczo uległ obniżeniu, a poziom mleczanu wzrósł, po karmieniu odnotowano wzrost poziomu glukozy i wyraźny wzrost laktemii (tab. 2).

W grupie badanej pierwszego rzutu znalazły się testy określające spektrum aminokwasów i acylokarnityn we krwi oraz kwasy organiczne w moczu, a także biomarkery mitochondrialne osocza FGF-21 i GDF-15. We krwi stwierdzono podwyższoną zawartość alaniny, leucyny i ornityny (tab. 3). Spektrum acylokarnityn we krwi mieściło się w normie, co pozwoliło wykluczyć choroby z grupy defektów β-oksydacji kwasów tłuszczowych. Analiza moczu wykazała wzrost poziomu mleczanu, kwasu fumarowego, 3-hydroksymaślanu, pirogronianu, bursztynianu i 4-hydroksyfenylopirogronianu (patrz Tabela 3). Zmiany te mogą wskazywać na mitochondria

Tabela 2. Wyniki próby z karmieniem

Ryż. 1. Dynamika stężenia mleczanów we krwi (w mmol/l). Figa. 1. Dynamika stężenia mleczanów we krwi.

naruszeniem nom i kwasicą fumarową.

Przeprowadzono molekularne badania genetyczne sekwencji nukleotydowej genu FH, którego mutacje powodują rozwój kwasicy fumarowej. Nie stwierdzono odchyleń od normy.

Stężenie markerów mitochondrialnych FGF-21 i GDF-15 w osoczu krwi wzrosło i wyniosło odpowiednio 720 pg/ml (norma 0-330 pg/ml) i 15715 pg/ml (norma 0-2000 pg/ml).

W wieku 8 dni życia dziecko zostało poddane rezonansowi magnetycznemu mózgu, którego wynik ujawnił symetryczną zmianę jąder podkorowych w postaci zmian torbielowatych, co jest wysoce

Parametr Przed posiłkiem 20-30 minut po posiłku

BE, mmol/l - 6,2 - 7,7

Glukoza, mmol/l 2,1 2,7

Mleczan, mmol/l 5,8 9,2

p CO2, mmHg 33,4 29,2

Tabela 3. Poziom aminokwasów we krwi pacjenta i kwasów organicznych w moczu

Parametr Dolna granica normy Górna granica normy Wartość u pacjenta

Aminokwasy we krwi, nmol/l

Alanina 85 750 1139.327

Leucyna 35 300 405,533

Ornityna 29 400 409.205

Kwasy organiczne w moczu, mol na mol kreatyniny

Mleczan 0,00 25,00 82,9

Kwas fumarowy 0,00 2,00 274,2

3-hydroksymaślan 0,00 3,00 18,2

Pirogronian 0,00 12,00 13,7

Bursztynian 0,50 16,00 103,4

4-hydroksyfenylopirogronian 0,00 2,00 39,5

patognomoniczny znak chorób mitochondrialnych. Ujawniono również konsekwencje krwotoku w komorach bocznych mózgu (ryc. 2).

Biorąc pod uwagę kompleks objawów klinicznych i laboratoryjnych, wysunięto podejrzenie choroby mitochondrialnej z grupy encefalomiopatii niemowlęcych. Za pomocą celowanego sekwencjonowania przeanalizowano u dziecka sekwencję kodującą 62 geny jądrowe, których mutacje prowadzą do rozwoju patologii mitochondrialnej. W genie FBXL4 zidentyfikowano dwie złożone heterozygotyczne mutacje c.A1694G:p. D565G (w eksonie 8) i c.627_633del:p.V209fs (w eksonie 4). Mutacja c.A1694G:p.D565G

Ryż. 2. MRI mózgu dziecka w wieku 8 dni życia. A - obraz ważony T2 w płaszczyźnie osiowej. Białe strzałki pokazują cysty wzdłuż konturów komór bocznych, które są charakterystyczną oznaką chorób mitochondrialnych. Czerwone strzałki umieszczone w wysoce konserwatywnym regionie pokazują produkty biodegradacji hemoglobiny w świetle komory i układu LRR (Leucine-Rich Repeat) i układu (konsekwencje krwotoku dokomorowego).

B - tomogram został wykonany w trybie Flair w płaszczyźnie osiowej. Białe strzałki pokazują cysty w okolicach przykomorowych oraz w projekcji jąder podkorowych, co jest typowe dla chorób mitochondrialnych. Figa. 2. Rezonans magnetyczny mózgu dziecka w wieku 8 dni życia Obraz A - T2 ważony w płaszczyźnie osiowej Białe strzałki pokazują torbiele wzdłuż konturów komór bocznych, które są charakterystyczną cechą chorób mitochondrialnych, Czerwone strzałki pokazują torbiele wzdłuż konturów komór bocznych produkty biodegradacji hemoglobiny w świetle układu komorowego (konsekwencje krwotoku śródkomorowego) B - tomogram wykonywany jest w Flair w płaszczyźnie osiowej Białe strzałki pokazują torbiele w okolicy przykomorowej oraz w projekcji jąder podkorowych, co jest charakterystyczne dla chorób mitochondrialnych.

wcześniej opisane w literaturze. Druga mutacja została znaleziona po raz pierwszy u naszej pacjentki, a jej patogenność nie budzi wątpliwości, gdyż prowadzi do przesunięcia ramki odczytu i powstania przedwczesnego kodonu stop.

W wieku 42 dni dziecko zostało wypisane do domu w stanie umiarkowanym. W obserwacji kontrolnej stwierdzono objawy depresji OUN, ciężkiego niedociśnienia mięśniowego, skłonność do opadanie powiek, niewyrównaną metaboliczną kwasicę mleczanową, opóźnienie psychoruchowe, dysfagię, monotonną płaską krzywą masy ciała, częste nawracające infekcje dróg oddechowych, które później prowadziły do ​​rozwoju niewydolność wielonarządowa i śmierć w wieku 11 miesięcy.

Dyskusja

W naszej obserwacji prenatalnej rozpoznano wodonercze po stronie prawej, torbiele podwyściółkowe mózgu oraz częściową niedrożność jelit na tle wielowodzia. Obraz ten podczas prenatalnej diagnostyki ultrasonograficznej opisano dla mutacji w genie FBXL4. W około 10% przypadków wielowodzie występuje na tle chorób wrodzonych, w tym dziedzicznych chorób metabolicznych. W obserwacji M. Van Rij i in. u pacjentki zdiagnozowano również ciężkie wielowodzie w 30. tygodniu rozwoju płodowego oraz stwierdzono organiczną zmianę struktury mózgu w postaci hipoplazji móżdżku, torbieli podwyściółkowych i ekspansji cysterny mózgowej. Prenatalne wykrycie torbieli podwyściółkowych mózgu opisano również w obserwacji T. Baroy i in. . W chorobach mitochondrialnych opisano również przypadki prenatalnej diagnostyki wodonercza.

Stan dziecka gwałtownie się pogorszył pod koniec 1. dnia życia po okresie „okresu świetlnego”, wystąpił wyraźny zespół depresji, niedociśnienie mięśniowe, zaburzenia oddechowe (wymagające sztucznej wentylacji płuc), pogorszenie hemodynamiki, zdekompensowany metabolizm kwasica mleczanowa. Noworodkowa manifestacja zespołu deplecji mtDNA w ponad 80% przypadków jest opisywana jako wyraźny zespół depresji, niedociśnienia mięśniowego, encefalopatii, dysfagii z epizodami zarzucania treści w połączeniu ze zwiększonym poziomem mleczanu i kwasicą metaboliczną występującą po okresie "okresu światła". Patogenetycznie wzrost poziomu mleczanu wynika z faktu, że przy funkcjonalnym naruszeniu łańcucha oddechowego zmienia się równowaga redoks w cytoplazmie, co prowadzi do zakłócenia funkcjonowania cyklu Krebsa z powodu nadmiaru NADH względem NAD+. Proces ten prowadzi do wzrostu stężenia mleczanu, wzrostu stosunku molowego mleczan/pirogronian oraz stężenia ciał ketonowych we krwi. Według piśmiennictwa poziom mleczanu u dzieci z zespołem wyniszczenia mtDNA typu 13 waha się od 6,3 do 21 mmol/l. W płynie mózgowo-rdzeniowym następuje wzrost poziomu mleczanu. Normalny stosunek molowy kompozycji mleczan/pirogronian wynosi

leży<20, тогда как, по данным M. Van Rij и соавт., у детей с мутациями в гене FBXL4 этот показатель составил 71 . У нашей пациентки уровень пирува-та не исследовался.

W naszej obserwacji hiperlaktatemia była wiodącą laboratoryjną cechą charakterystyczną choroby, ale objaw ten nie jest wysoce specyficzny. Przyczyną wzrostu stężenia mleczanu we krwi może być również asfiksja okołoporodowa, wrodzone wady serca, posocznica, choroby wątroby i nerek, wady p-oksydacji kwasów tłuszczowych, kwasica organiczna, upośledzony metabolizm biotyny, metabolizm węglowodanów itp. , co stwarza duże trudności we wczesnej diagnozie patologii.

Podczas badania pacjenta stwierdzono rozbieżność między klinicznymi objawami procesu zakaźnego ze zdekompensowaną kwasicą mleczanową a ujemnymi markerami ogólnoustrojowej odpowiedzi zapalnej w połączeniu z brakiem ognisk zakażenia i bakteriemią. Na tle terapii posidromicznej nastąpiła pewna poprawa stanu dziecka, ale utrzymywały się zaburzenia neurologiczne i ciężka kwasica mleczanowa, co pozwalało podejrzewać chorobę metaboliczną. W badaniu spektrum aminokwasów ujawniono podwyższone stężenie alaniny, leucyny i ornityny, które często występuje w kwasicy mleczanowej. Poziom mleczanów w moczu, a także metabolitów cyklu Krebsa (kwas fumarowy, pirogronian, bursztynian) uległ znacznemu podwyższeniu, co jest również charakterystyczne dla wielu chorób mitochondrialnych. Podobne zmiany w kwasach organicznych w moczu opisał M.C. Van Rij i in. w obserwacji klinicznej

dziecko z zespołem wyniszczenia mtDNA typu 13.

U opisywanej pacjentki stężenie FGF-21 w osoczu przekraczało 2 razy górną granicę normy, a stężenie GDF-15 ponad 7 razy. Dane te są zgodne z ostatnimi publikacjami, że GDF-15 jest bardziej czułym markerem patologii mitochondrialnej. W wątrobowo-mózgowych postaciach zespołu deplecji mtDNA poziom obu markerów wzrasta średnio 15-krotnie powyżej normy. W wieku 8 dni życia dziecka wykonano rezonans magnetyczny mózgu, który ujawnił wysoce specyficzne objawy encefalomiopatii w postaci choroby mitochondrialnej: symetryczne zmiany jąder podkorowych w postaci zmian torbielowatych.

W pracy przedstawiono zatem przypadek pacjentki z noworodkową manifestacją choroby mitochondrialnej, zespołu deplecji mtDNA typu 13, spowodowanej mutacjami w genie FBXL4. Pierwsze objawy choroby były niespecyficzne i miały charakter zespołu objawów przypominających sepsę, które pojawiły się po okresie luki światła w stanie dziecka. Stwierdzono wyraźny zespół depresyjny, hipotensję mięśniową, a także uporczywą kwasicę mleczanową, wzrost poziomu biomarkerów mitochondrialnych FGF-21 i GDF-15 w osoczu krwi oraz symetryczne zmiany w strukturach podkorowych w MRI mózgu. Obecnie nie ma patogenetycznego leczenia zespołu deplecji mtDNA, ale identyfikacja genotypu pacjentki daje podstawę do diagnozy prenatalnej, która pomoże zapobiec ponownemu narodzinom chorego dziecka w rodzinie.

LITERATURA (ODNIESIENIA)

1. Wallace DC. Choroby mitochondrialne u człowieka i myszy. Nauka 1999; 283: 1482-1488.

2. Pfeffer G., Majamaa K., Turnbull D.M., Thorburn D., Chinnery P.F. Leczenie zaburzeń mitochondrialnych. Cochrane Database Syst Rev 2012; 4:1-42. DOI: 10.1002/14651858. CD004426.pub3

3. Maypek E. Wrodzone błędy metabolizmu – wczesne wykrywanie, kluczowe objawy i opcje terapeutyczne. Brema. UNI-MED, 2008; 128.

4. Schaefer A.M., Taylor R.W., Turnbull D.M., Chinnery P.F. Epidemiologia zaburzeń mitochondrialnych – przeszłość, teraźniejszość i przyszłość. Biochim Biophys Acta 2004; 1659: 115-120.

5. Honzik T, Tesarova M., Magner M., Mayr J., Jesina R. i in. Noworodkowy początek zaburzeń mitochondrialnych u 129 pacjentów: charakterystyka kliniczna i laboratoryjna oraz nowe podejście do diagnozy. J Odziedzicz Metab Dis 2012; 35:749-759. DOI 10.1007/s10545-011-9440-3

6. Gibson K., Halliday JL, Kirby DM, Yaplito-Lee J., Thorburn DR, Boneh A. Zaburzenia mitochondrialnej fosforylacji oksydacyjnej u noworodków: objawy kliniczne i diagnozy enzymatyczne i molekularne. Pediatria 2015; 122:1003-1008. DOI: 10.1542/ped.2007-3502

7. Debray F.G., Lambert M., Mitchell G.A. Zaburzenia mito-

funkcja akordowa. Curr Opin Pediatr 2008; 20:471-482. DOI: 10.1097/M0P.0b013e328306ebb6

8. Van Rij M.C., Jansen F.A.R., Hellebrekers D.M.E.I., Onkenhout W, Smeets H.J.M., Hendrickx A.T. i in. Wielowodzie i zanik móżdżku: prenatalna prezentacja encefalomiopatii mitochondrialnej spowodowanej mutacjami w genie FBXL4. Clin Case Rep 2016; 4(4):425-428. DOI: 10.1002/ccr3.511

9. Koene S., Smeitink J. Medycyna mitochondrialna. Wytyczne kliniczne. pierwsza edycja. Holandia. Khondrion i Nijmegen, 2011; 135.

10. T. D. Kryłowa, T. Yu Proshlyakova, G. V. Baidakova, Yu S. Itkis, M. V. Kurkina i E. Yu. Biomarkery w diagnostyce i monitorowaniu leczenia chorób organelli komórkowych. Genetyka medyczna 2016; 15(7):3-10.

11. Liang C., Ahmad K, Sue C.M. Poszerzenie spektrum chorób mitochondrialnych: Zmiany paradygmatu diagnostycznego. Biochim Biophys Acta 2014; 1840(4): 1360-1367. DOI: 10.1016/j.bbagen.2013.10.040

12. Davis R., Liang C., Edema-Hildebrand F., Riley C., Need-ham M. Czynnik wzrostu fibroblastów 21 jest wrażliwym bio-markerem choroby mitochondrialnej. Neurologia. Amer Acad Neurol 2013; 81: 1819-1826. DOI: 10.1212/01. wnl.0000436068.43384.ef

13. Pagliarini D.J., Calvo S.E., Chang B, Sheth SA, Vafai S.B., Ong S.E. i in. Kompendium białek mitochondrialnych wyjaśnia biologię kompleksu I choroby. Komórka 2008; 134(1): 112-123. DOI: 10.1016/j.komórka.2008.06.016

14. Danilenko N.G., Tsygankova P.G., Sivitskaya L.N., Levdansky O.D., Davydenko O.G. Zespoły deplecji mitochondrialnej w praktyce neurologicznej: cechy kliniczne i diagnostyka DNA. Neurologia i Neurochirurgia (Europa Wschodnia) 2013; 19(3):97-111.

15. El-Hattab A.W., Craigen W.J., Scaglia F. Defekty utrzymania mitochondrialnego DNA. Biochim Biophys Acta 2017; 1863(6): 1539-1555. DOI: 10.1016/j.bbadis.2017.02.017

16. A. V. Degtyareva, E. Yu. Niedobór mitochondrialnej kinazy deoksyguanozynowej. Biuletyn Rosyjskiego Państwowego Uniwersytetu Medycznego 2009; 1:27-30.

17. Mikhailova S.V., Zakharova E.Yu., Tsygankova P.G., Abrukova A.V. Polimorfizm kliniczny encefalomiopatii mitochondrialnych spowodowany mutacjami w genie polimerazy gamma. Roswestn ped i perinatol 2012; 57:4(2):54-61.

18. Bonnen P.E., Yarham J.W., Besse A., Wu P., Faqeih E.A., Al-Asmari A.M. i in. Mutacje w FBXL4 powodują encefalopatię mitochondrialną i zaburzenie utrzymania mitochondrialnego DNA. Am J Hum Genet 2013; 93:471-481. DOI: 10.1016/j.ajhg.2013.07.017

19. Gai X., Ghezzi D., Johnson M.A., Biagosch C.A., Shamseld-in H.E., Haack T.B. i in. Mutacje w FBXL4, kodowanie

Otrzymano 20.05.17

należy zgłosić wsparcie.

białko mitochondrialne, powoduje wczesną encefalomiopatię mitochondrialną. Am J Hum Genet 2013; 93:482-495. DOI: 10.1016/j.ajhg.2013.07.016

20. Huemer M., Karall D., Schossig A., Abdenur J.E. Parametry kliniczne, morfologiczne, biochemiczne, obrazowe i końcowe u 21 osób z defektem utrzymania mitochondriów związanym z mutacjami FBXL4. J Dziedziczy Metab Dis 2015; 38(5): 905-914. DOI: 10.1007/s10545-015-9836-6

21. Antoun G., McBride S., Vanstone J., Naas T., Michaud J., Red-path S. Szczegółowa charakterystyka biochemiczna i bioenergetyczna zubożenia mitochondrialnego DNA związanego z FBXL4. Raporty JIMD 2016; 27:1-9. DOI: 10.1007/8904_2015_491

22. Baroy T., Pedurupillay C., Bliksrud Y, Rasmussen M., Holmgren A., Vigeland MD. i in. Nowa mutacja w FBXL4 u norweskiego dziecka z encefalomiopatycznym zespołem deplecji mitochondrialnego DNA 13. Eur J Med Genet 2016; 59; 342-346. DOI: 10.1016/j.ejmg.2016.05.005

23. Winston J.T., Koepp D.M., Zhu C., Elledge S.J., Harper J.W. i in. Rodzina ssaczych białek F-box. Curr Biol 1999; 9:1180-1182

24. Nirupam N., Nangia S., Kumar A., ​​Saili A. Niezwykły przypadek hiperlaktatemii u noworodka. Stażysta J STD & AIDS 2012; 24(12): 986-988. DOI: 10.1177/0956462413487326

25. Lefevere M.F., Verhaeghe B.J., Declerck D.H., Van Bocxlaer J.F., De Leenheer A.P., De Sagher R.M. Profilowanie metaboliczne kwasów organicznych w moczu metodą jedno- i wielokolumnowej kapilarnej chromatografii gazowej. J Chromatogr Sci 1989; 27(1):23-29.

26. Mroch A.R., Laudenschlager M., Flanagan J.D. Wykrycie nowej delecji całego genu FH w propositusie prowadzącej do późniejszej diagnostyki prenatalnej u rodzeństwa z niedoborem fumarazy. Am J Med Genet Część A 2012; 158A: 155-158. DOI: 10.1002/ajmg.a.34344

27. Dashe J., McIntire R.D., Ramus R., Santos-Ramos, Twickler D.M. Hydramnios: występowanie anomalii i wykrywanie ultrasonograficzne. Obstet Gynecol 2002; 100:134-139.

28. Raju G.P., Li H.C., Bali D., Chen Y.T., Urion D.K., Lidov H.G. i in. Przypadek wrodzonej choroby spichrzania glikogenu typu IV z nową mutacją GBE1. J Child Neurol 2008; 23: 349352. DOI: 10.1177/0883073807309248

29. Montero R., Yubero D., Villarroya J., Henares D., Jou C., Rodriguez M.A., Ramos F. et al. GDF-15 jest podwyższony u dzieci z chorobami mitochondrialnymi i jest indukowany przez dysfunkcję mitochondrialną. PLoS ONE 2016; 11(2): e0148709.